SIRNA抑制感染细胞模型中HCV复制的研究
邢小康1，何继亮2，陈 智1
【摘 要】［摘 要］ 目的:探讨siRNA能否有效抑制丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞中HCV的复制。方法:用HCV JC1质粒体外制备HCV RNA转录体，转染Huh-7.5.1细胞，收集细胞上清，再次孵育Huh-7.5.1细胞以建立HCV感染细胞模型，并用间接免疫荧光检测细胞内HCV核心蛋白的表达。将针对HCV NS5B基因的siRNA转染HCV感染细胞(浓度为4、40和200 nmol/L，时间为24 h、48 h和72 h)，将4、40和200 nmol/L siRNA转染正常Huh-7.5.1细胞，并设空白对照、脂质体对照、无关siRNA对照以及IFNα-2b(1 000 IU/ml)组，用荧光定量PCR检测细胞内HCV RNA和PKR mRNA水平。结果:HCV感染的Huh-7.5.1细胞中检测出HCV核心蛋白表达。40 nmol和200 nmol/L siRNA 24 h组及4、40、200 nmol/L siRNA 48 h和72 h组，HCV RNA 水平分别降至58%、54%、29%、17%、17%、33%、22%、19%，明显低于对照组(P＜0.05或 P＜0.01)。1 000 IU/ml IFN的各时间组HCV RNA水平均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01)。各浓度siRNA组的PKR mRNA的表达与对照组无明显差异(P＞0.05)。结论:针对HCV NS5B区的siRNA能够明显抑制HCV感染细胞中HCV的复制，而不引起双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)基因表达的激活。 【期刊名称】浙江大学学报（医学版） 【年(卷),期】2011(040)006 【总页数】6
【关键词】［关键词］ 肝炎病毒属/遗传学;RNA，小分子干扰/遗传学;丙型肝
siRNA抑制感染细胞模型中HCV复制的研究
