支生产母种可转接 5--8 瓶二级种，接完后马上放入 25----27 度的恒温箱中培养，没有恒温箱也可以放在能保持 25 度条件下培养。每 3---5 天检查一次，把长势不好、不纯的及时挑出。经 25 天左右培养，就能长满瓶，满瓶后应再巩固培养 5 天，才能转接三级种。二级种可采用12*24丙烯袋装,因为罐头瓶不好买,大规模制种都有采用塑料袋.
原种制作要领：料要干，无变质，加入原料必须精确，灭菌必须达到杀死一切微生物。接种要在绝对无菌条件下进行，盖瓶塑料必须用聚丙烯塑料，因为丙烯塑料比玻璃还透明，就是有小米粒大小的杂菌，也能清楚的观察到。 （三）.栽培种的制作
栽培种配方可完全参照二级配方和制作方法，但培养基营养配比应接近于栽培料，使菌丝有一个更适应的过程. 栽培料配方:
配方1：棉子壳 100 斤，石灰 4 斤，硫酸镁 4 两，克霉灵 1 两 ,尿素0.5斤,二氢钾3两,玉米面10斤,含水量65% 。
配方2：棉子壳 100 斤，石灰 1.5 斤，石膏 2 斤，克霉灵 1 两，高锰酸钾 1 两。
配方3：棉子壳 100 斤，生石灰 3 斤，磷肥 1.5 斤，尿素 2 两，硫酸镁 3 两，克霉灵 1 两，碳酸钙 1 斤。 配方4：玉米芯 100 斤，玉米面 25 斤，高锰酸钾 1 两，克霉灵 1 两，磷酸二氢钾 3 两，尿素 3 两，复合肥肥 3 两，硫酸镁 4 两，碳酸钙 1 斤，石灰 4 斤，菇丰素 15 克，大粒盐 1 斤（发酵料添加）。
配方5：玉米芯 100 斤，夫子 15 斤，米糠 20 斤，克霉灵 2 两，尿素 5 两，磷酸二氢钾 3 两，硫酸镁 5 两，石灰 3 斤，石膏 1 斤，增产素 1 支，大粒盐 1 斤（发酵料用）。 配方6：花生壳粉 65 斤，玉米芯 35 斤，玉米面 5 斤，黄豆粉 10 斤，磷酸二氢钾 5 两，石灰 3---4 斤，克霉灵 1--2 两，过磷酸钙 5 两，硫酸镁 4 两。
配方7：豆秸粉 50 斤，木屑 30 斤，玉米芯 20 斤， 夫子 13 斤，玉米面 10 斤，石灰 4 斤，克霉灵 2 两，过磷酸钙 5 两，尿素 4 两，硫酸镁 5 两，菇丰素 15 克，碳酸钙 1 斤。 配方8：玉米芯 100 斤，玉米面 10 斤，黄豆粉 10 斤，米糠 5 斤，尿素 5 两，复合肥 3 两，硫酸镁 3 两，石灰 3 斤，过磷酸钙 1 斤，克霉灵 2 两。 配方9：木屑 87% ，夫皮 5% ，玉米面 5% ，石灰、石膏、磷肥各 1% ，克霉增产灵 0.1% 。 配方10：豆秆、木屑混合物 80 斤，夫皮 10 斤，鸡粪 5 斤，玉米面 5 斤，豆饼 5 斤，石灰 4 斤，磷肥 1 斤，尿素 3 两，克霉灵杀菌剂 2 两，碳酸钙 1 斤，硫酸镁 5 两,发酵期15--20天。
五．平菇栽培料拌料要点：
1 ．料要新，不能有发霉、成团、虫卵等。
2 ．主料以复合料为好，养份全、透气性好，有利于菌丝生长，确保高产。即使是单一的使用一种主料如玉米芯，也要注意料的粗、细。 料、水比例，不同的原料在栽培时加入的水量是不同的，不能只根据以往的某一经验一成不变。如棉子皮不脱绒时，料水比在 1 ： 1 . 5 ，而脱绒的棉子皮在加水时，料水比在 1 ： 1 .3 左右。另外，原料的干、湿程度，原料的颗粒大小都影响拌料时的加水量。再有，质的不同的原料吃水程度也不同，玉米芯原料拌完后 2 小时左右才能吃透水，也就是说，要在拌完玉米芯主料闷 2 小时后，用手紧握一把料，手指间有水珠但不下落即为含水量 65% 。
3 ．为达到主料与辅料等混合均匀，要先把主料、夫皮、玉米面、石灰、石膏干拌均匀，再
把肥料、微量元素、杀菌剂、增 产剂溶于水中再均匀的加入主料中。一般发酵料在第二次翻堆时加入杀虫剂。另一个方法是干拌法,把所有的辅料都拌在一起,然后撒在主料的表面,干拌两遍,再向料堆加清水,省工,快速,均匀。 六、地平菇培养过程和要点
菌床 播种 培养 收获 菌床处理 1、菌床的制作过程：
干稻草（1吨）用30%生石灰（200Kg生石灰、500Kg清水）左右浸泡三天。
整理地面：1米宽、10米长、0.3米深。地面要平、土壤要丰富。用生灰散一层，然后喷散高锰酸钾溶液（浓度应为１∶１０００）。上铺用生石灰浸泡的稻草（厚5厘米左右）然后散上一层生石灰，再一层稻草，一层生石灰，如此反复6次。 2、播种：把上面第一层稻草的1/2揭开散上2厘米大的栽培种3-5个，距离5-8厘米，复原稻草。喷洒0.1%高锰酸钾溶液。盖上薄膜。
3、培养：前三不管。每天把薄膜揭一下，盖上，补充氧气。 4、收获。摘在留小。注意不要污染菌床。 5、菌床处理。生石灰散菌床，深翻土。 附录：
1、 微生物计数
显微镜直接计数：
1.1学习接目测微计的校正方法， 了解血球计数板的构造和计数原理
1.2 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小， 掌握用血球计数板测定微生物细胞总数的方法。
2.0原理
微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物个体微小，必须借助于显微镜才能观察，要测量微生物细胞大小，也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。
显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。后者可直接用于测量细胞大小。它是一块.圆形玻片(图7—1)，其中央有精确等分到度，测量时将其放在接目镜中的隔板上。由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小，刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变，所以，使用前须先用镜台测微计进行标定，求出某一放大率下，目镜测微计每一小格所代表的长度，然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。镜台测微计是一块中央有精确刻玻片(图7—1)，刻度的总长为lmm，等分为100小格，每小格长10um，专用于对目镜测微计进行标定的。
3.0 材料 3.1 器械
显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺，载玻片、盖玻片、血球计算板、擦镜纸、吸水纸、玻片架、肾形盘、洗瓶、接种环、酒精灯、火柴、滴管。
3.2 菌种
培养48h的啤酒酵母斜面菌体和菌悬液。 3.3 革兰氏染液 4.0流程
4.1 置目测微计→置台测微计→标定目测微计→测菌体大小→记录结果→用毕擦拭干净 4.2 检查计数板→稀释样品→加样→计数→计算→清洗
5 步骤
5.1 微生物菌体大小的测定 5.1.1 目镜测微尺的校正 5.1.1.1 更换目镜镜头 更换目镜测微尺镜头（标记为PF）；或者取下目镜上部或下部的透镜，在光圈的位置上安上目镜测微尺，刻度朝下，再装上透镜，制成一个目镜测微尺的镜头。
5.1.1.2 某一倍率下标定目镜刻度
将镜台测微尺置于载物台上，使刻度面朝上，先用低倍镜对准焦距、看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器使两尺重叠，并使二尺的左边的某一刻度相重合，向右寻找另外二尺相重合的刻度。记录两重叠刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数(图7-1C)。
5.1.1.3 计算该倍率下目镜刻度
目镜测微尺每格长度=镜台测微尺格数/目镜测微尺格数xl0um 5.1.1.4 标定并计算其他放大倍率下的目镜刻度
以同样方法分别在不同倍率的物镜下测定目镜测微尺每格代表的实际长度。如此测定后的测微尺的长度，仅适用于测定时使用的显微镜以及该目镜与物镜的放大倍率。
5.1.2 菌体大小的测定
5.1.2.1 将啤酒酵母制成水浸片。 5.1.2.2 大小换算
将标本先在低倍镜下找到目的物，然后在高倍镜下用目镜测微尺测定每个菌体长度和宽度所占的刻度，即可换算成菌体的长和宽。
5.1.2.3 求平均值
一般测量微生物细胞的大小，用同一放大倍数在同一标本上任意测定l0一20个菌体后，求出其平均值即可代表该菌的大小。
5.2 用血球计数板测定微生物细胞的数量 5.2.1 检查血球计数板
取血球计数板一块，先用显微镜检查计数板的计数室，看其是否沾有杂质或干涸着的菌体，若有污物则通过擦洗、冲洗，使其清洁。镜检清洗后的计数板，直至计数室无污物时才可使用。
5.2.2 稀释样品
将培养后的酵母培养液振荡振摇混匀，然后作一定倍数的稀释。稀释度选择以小方格中的分布的菌体清晰可数为宜。一般以每小格内含4～5个菌体的稀释度为宜。
5.2.3 加样
取出一块干净盖玻片盖在计数板中央。用滴管取1滴菌稀释悬液注入盖玻片边缘，让菌液自行渗入，若菌液太多可用吸水纸吸去。静置5—10分钟。
5.2.4 镜检
待细胞不动后进行镜检计数。先用低倍镜找到计数室方格后，再用高倍镜测数。一般应取上下及中央五个中格的总菌数。计数时若遇到位于线上的菌体，一般只计数格上方（下方）及右方（左方）线上的菌体。每个样品重复3次。
5.2.5 计算
取以上计数的平均值，按下列公式计算出每毫升菌液中的含菌量。
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