利拉鲁肽对2型糖尿病非酒精性脂肪肝病小鼠的作用研究

利拉鲁肽对2型糖尿病非酒精性脂肪肝病小鼠的作用研究

邢冬杰 宿世震 陈桂玉 张彩坤 宋桂红 刘晓庆

【摘 要】[摘要]目的 探讨利拉鲁肽对2型糖尿病非酒精性脂肪肝病的保护作用及机制。方法 选取50只小鼠，随机分为正常对照组（15只）和高糖高脂饲料组（35只），采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素的方法，建立2型糖尿病非酒精性脂肪肝病的小鼠模型，经处理分为正常对照组、模型对照组、利拉鲁肽组，每组10只。利拉鲁肽皮下注射8周，观察各组空腹血糖（FBG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性、胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及肝指数等指标；检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）的水平；采用HE染色及油红“O”染色观察肝组织病理改变；采用免疫组织化学法检测肝组织中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（BaX）的表达。结果 与正常对照组比较，模型对照组大鼠的FBG、FINS、HOMA-IR增高，血清TG、TC、ALT、AST含量升高，肝指数增高，肝组织中SOD活性降低、MDA含量升高、TNF-α及IL-8水平上升，HE染色、油红“O”染色肝组织中脂肪性变明显，Bcl-2蛋白表达明显减少，BaX 蛋白表达明显增加（P＜0.01，P＜0.05）。 与模型对照组比较，利拉鲁肽组的 FBG、TG、TC、ALT、AST含量降低，HOMA-IR及肝指数下降；肝组织中SOD活性升高，MDA含量及TNF-α、IL-8水平下降（P＜0.01）；HE染色、油红“O”染色肝组织中脂肪性变明显减轻，Bcl-2蛋白表达明显增加，BaX蛋白表达明显降低（P＜0.01）。结论 利拉鲁肽对2型糖尿病非酒精性脂肪肝病的小鼠肝脏具有保护作用，其机制可能与其抗氧化作用、减少炎症因子的表达及调节凋亡相关蛋

白Bcl-2、BaX的表达有关。 【期刊名称】中国当代医药 【年(卷),期】2024(025)033 【总页数】5

【关键词】[关键词]2型糖尿病；非酒精性脂肪肝病；利拉鲁肽；B淋巴细胞瘤-2；Bcl-2相关X蛋白

[基金项目]山东省医药卫生科技发展计划项目（2015WS0127）

近年来，糖尿病非酒精性脂肪肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）的发病率日益升高，据统计，2 型糖尿病（type 2 diabetes，T2DM）的NAFLD 发病率达34%～74%，特别是伴有肥胖的T2DM，NAFLD发病率几乎为100%[1-2]，因此，明确T2DM合并NAFLD的发病机制以及寻求有效的药物，对防治T2DM合并NAFLD具有重要意义。利拉鲁肽是胰高血糖素样肽-1受体激动剂类药物，具有降低血糖、血脂、减轻体重、改善胰岛素抵抗等作用[3-4]，其作为新的降糖药物已广泛应用于T2DM的临床治疗。新近研究显示[5]，利拉鲁肽对肝脏具有保护作用，可以降低NAFLD大鼠的三酰甘油（triglyceride，TG）、胆固醇（cholesterol，TC）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT） 的水平。为了深入研究利拉鲁肽独立于降糖之外的作用，本研究通过高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素建立T2DM合并NAFLD小鼠模型，给予利拉鲁肽干预治疗8周，观察利拉鲁肽对肝脏的保护作用和及其机制，为其临床治疗提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 KM小鼠，6周龄，SPF级，雄性，体质量18～23 g，山东大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（鲁）20130009。

1.1.2 药物与试剂 利拉鲁肽为丹麦诺和诺德公司生产，批号为S20160020；高糖高脂饲料（10%猪油、10%蔗糖、2%胆固醇、10%蛋黄粉、68%基础饲料）同江苏协同生物有限公司提供，批号为201609012；链脲佐菌素（streptozocin，STZ），由Sigma公司国内分装，批号为S0132；TG、TC、ALT、 天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）， 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、考马斯亮蓝蛋白、丙二醛（malondialdehyde，MDA）购自南京建成生物科技有限公司，批号分别为 20170218、20170311、20170215、20170321、20170221、20170308、20170319； 肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF-α）、白介素-8（interleukin-8，IL-8）、游离胰岛素（free insulin，FINS）购自南京晓劢生物科技有限公司，批号为 20170308、20170322、20170328；B 细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）抗体及Bcl-2 相关 X 蛋白（Bcl-2-assaciated xprotein，Bax）抗体由Santa cruz提供，批号为20170326；根过氧化物酶购自碧云天生物技术有限公司，批号为122115160419。

1.1.3 仪器 微量血糖仪及配套试纸（德国罗氏诊断公司，活力型）；离心机（湖南湘仪离心机仪器有限公司，L-530）；全自动生化分析仪（雅培，CTi16000）；冰冻切片机（德国 leica，CM1860）；光学显微镜（日本奥林巴斯有限公司，TS-100）；智能放免r测量仪（上海原子核研究所日环仪器一厂，SN-695B型）；凝胶成像系统（上海天能科技有限公司，5300型）等。 1.2 方法