LSC-C-PG-023 1-4
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文件名称 制订生效日 制 定 旋光度测定法标准操作规程 白云苍狼 修订生效日 审 核 文件编号 / / LSC-C-PG-023 版次/修订 核 准 1/0
目的：规范旋光度的测定，以保证检验结果的准确性。 范围：旋光度的测定。
责任：检验人员对本制度的实施负责，品质部主任监督本制度的执行。 内容： 1.简述
旋光度测定法是利用平面偏振光，通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常又以“+”号表示。使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“-”号表示。影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。当偏振光通过长 1dm、每 1ml中含有旋光性物质 1g的溶液，使用光线的波长通常用钠光D线（589.3nm） 或汞的 404.7、546.1nm等谱线，测定温度为 20℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以
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﹝a﹞ 表示。比旋度物质的物理常数。因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品纯
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杂程度。由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故而还可以用来测定含量。2．仪器与性能测试
2.1 旋光仪又称旋光计，是较早出现的商品分析器。六十年代前我们使用的仪器大都是国外的圆盘旋光仪，规格为 0.05°或 0.01°。其后，我国上海等在仪器厂也生产一些圆盘旋光仪， 但精度不高。七十年代后国外由于自动指示旋光仪的出现，圆盘旋光仪逐渐被淘汰，同时在我国也相继出现了不同型号的自动指示旋光仪。八十年代数显式自动指示旋光仪和投影式自动指示旋光仪相继出现。仪器的读数精度也有了很大提高，由原来的0.05°提高为 0.02° 、0.01° 和 0.005°。有些国外旋光仪尚可选用不同波长的光，读数可达 0.001°。中国药典 2020 年版 四部 通则 0621 旋光度测定法沿袭历史版本，规定用读数至 0.01°并经过检定的旋光仪。 2.2 仪器的性能测试 根据中华人民共和国国家计量规程 JJG675—90 旋光仪的规定，按照仪器测量结果的准确度，仪器分为 0.01 、0.02 和 0.03 三种准确度等级，仪器检定的项目， 除准确度外，还有重复性和稳定性，其它尚有对测试管盖玻片内应力和测试管长误差等要查。 2.2.1 旋光仪的检定，中国药典 2000 年版起规定可用标准旋光管进行，读数误差应符合规定。
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2.2.2 我国国家技术监督局已有旋光标准石英管供应，即可用+5°和--1°标准石英管，检定方法可参照 JJG675—90 规定，要求在规定温度下，记录仪器的零点值，再放上旋光标准石英管，读取仪器示值，如此反复测定 6 次，按规定处理测定结果，与示值不能超出±0.01°．此外并要求将测定管旋转不同角度和倒向测定，误差都不得大于 0.04°。
2.2.3 中国药典 1990 年版附录收载有用蔗糖作为基准物作旋光仪的性能检定，系取经 105 ℃干燥 2 小时的蔗糖（化学试剂一级），精密称定，加水溶解，并定量稀释至１ml 中含中含 0.2g 的溶液，依法测定，结果在 20℃时比旋度应为 66.60°。但用蔗糖检定时蔗糖的纯度、水分都必须符合要求，称量和稀释也必须非常准确，否则测定结果容易产生误差。而且蔗糖溶液易生霉，不能长时间放置；因此目前国际上多不采用标准糖液法校验仪器，国际统一糖分析委员会 （ICUMSA）推荐用标准石英旋光管校验仪器，我国国家技术监督局颁布的旋光仪检定规程，也采用标准石英旋光管校准仪器。 3．样品测定操作法
旋光度测定法主要用于药典某些品种性状项下比旋度的测定，或一些制剂的含量测定。 3.1 比旋度的测定
按各品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定。中国药典要求：如无特殊规定，旋光度的测定温度，应在（20±0.5）℃。测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除空白读数。如调节室温有困难，宜用具有夹层可联通恒温水浴的试样管，盛供试品溶液，恒温后测定。不得已时，可在恒温水浴中配制供试品溶液，再迅速移入试样管测定。药典规定常用测定比旋度的溶液多为水溶液，有时也用稀释的盐酸溶液或氢氧化钠试液，或有机溶剂如乙醇、氯仿、二氧六环等溶液， 主要是按照供试品在各种溶剂中的溶解情况定。药典配制溶液的浓度大都根据药品的比旋度大小，使配成的测定液旋光度一般应在左旋或右旋 2～8°范围，测定值大小，在读取旋光度时容易造成误差，且在称量上也易产生误差，一些溶解小的可以例外。用旋光法作含量测定时应当称取 2 份做平行试验。装入测定溶液时应避免产生气泡，旋紧测试管两端螺帽时，不应用力
过大以免和产生应力，造成误差，测定旋光度应重复读取 3 次，取平均值，按规定公式计算结果。
3.2 用旋光法测定供试品的含量 测定时要求按照各该品种含量测定项下规定操作，配制浓度太大或太小，有时会影响测定结果的准确度。 4 测定操作注意事项
4.1 温度对旋光度影响不大的供试品，一般可在室温测定。对温度有严格要求约供试品，必须按规定执行，否则会造成误差。
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4.2 未接通电源前应检查仪器样品室内有无异物，钠光灯和其它示数开关是否放在关或规定的位置，仪器放置位置是否合适。钠光类启辉后仪器不许搬动，以免损坏钠光灯。具有直流极性开关的仪器应适当选取择转换方向。
4.3 钠光灯启辉后至少 20 分钟后发光才能稳定，测定或读数时应在钠光灯稳定后读取，测定时钠光灯尽量使用直流电路供电。有的仪器规定不测定时间隔较长时，可置于交流供电，以延长钠灯寿命。
4.4 测定零点或停点时，必须按动复测按扭数次，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位， 减少仪器的机械误差。同时通过观察左右复测数次的停点，检查仪器的重复性和稳定性，必要时也可用旋光标准石英管校正仪器的准确度。
4.5 测定管若有气泡，应先使气泡浮于凸颈处—或除去。透光面两端的玻璃应用软布擦干， 测定管两端的螺帽应旋至适中位置，过紧容易产生应力，过松容易漏液。测定管旋转时应注意标记的位置和方向。读取零点或停点应重复 3 次。
4.6 往测试管加入供试品溶液时，应反复用供试品溶液冲洗测试管数次，以免供试液浓度改变。
4.7 浑浊或含有小颗粒的溶液不能测定，应先将溶液离心或滤过，弃去初滤液后取滤液测定。在测定液长有强吸收的溶液也不能测定。
4.8 有些化合物见光后旋光度变化很大，应绝对避光操作，有些化合物对放置时间要求很严格，必须完全按照规定的时间测定读数。
4.9 仪器的各个光学镜片应保持干燥清洁，防止灰尘和油污的污染，钠灯有一定的使用寿命， 连续使用一般不超过 4 小时，亦产准瞬间内反复开关。
4.10 测定结果后测试管必须洗净凉干，以备下次再用，不准许将盛有供试品的测定管长时间的放置在仪器的样品室内。仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。 5 计算与结果判断
5.1 供试品的比旋度[a]按下列化式计算：
t
液体样品
﹝a﹞ ＝
D
a 1d
t D
100a 1c
固体样品 ﹝a﹞ ＝
式中 D 为钠光谱的 D 线；
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t 为温度；
1 为测试管长度 dm; a 为测得的旋光度； d 为液体的相对密度；
c 为 100ml 溶液中含有被测物质的重量，g(按干燥品或无水物计算)。
5.2 结果的判断 旋光法多用于比旋度测定，药典规定的比旋度多有一下限度或最低限度， 可根据上述计算公式得出供试品比旋度，判断样品是否合格。测定含量时，2 份供试品测定读数结果其极差应在 0.02°以内，否则应重做。
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