磷酸盐缓冲液配制方法
Last revision on 21 December 2020
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
PBS
PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH PBS缓冲液(~):NaCl 137mmol/L,KCl L,Na2HPO4 L, KH2PO4 L
称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。 母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水 各种浓度PB(pH=的配制:
先配 0.2M PB (pH=,100ml):取19ml L的 NaH2PO4, 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。 然后 只需将0.2M PB (pH=按相应比例适当稀释 即可,如: 0.1M PB(PH=) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PB (PH=):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.02M PB (PH=):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至%(g/100ml)即可。 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 : pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
92 8
90 10
85 15
51 49 45 55 38 62 33 67 28 72 23 77 19ml 81ml 16 84 13 87
7 93
0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PH
H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl Na2HPO4 NaH2PO4
磷酸盐缓冲液配制方法
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