cys蛋白酶-3对离体培养的骨骼肌蛋白降解的影响

cys蛋白酶-3对离体培养的骨骼肌蛋白降解的影响

吴焱秋;柴家科;张海龙;耿祎楠

【期刊名称】《中国美容医学》 【年(卷),期】2014(023)007

【摘要】目的:通过体外培养骨骼肌细胞,测定凋亡效应相关蛋白酶cys蛋白酶-3(caspase-3)及其抑制剂对骨骼肌细胞蛋白降解率的影响,探讨骨骼肌细胞凋亡的可能的调控因子.方法:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体的反应体系中加入1单位的重组Caspase-3,通过Western Blot电泳.体外培养骨骼肌细胞,并刺激其形成肌管,将培养的骨骼肌分为3组,分别为对照组、实验组A加入1单位Caspase-3,实验组B加入50 nM Caspase-3的抑制剂Ac-DEVD-CHO,体系中均加入2mM ATP(三磷酸腺苷).用氨基酸全谱分析仪测定酪氨酸和3-甲基组氨酸的浓度.结果:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体和1单位的重组Caspase-3,均可见到14kDa-actin条带,而肌动球蛋白复合体在0.5μg、1μg剂量时条带消失,在2μg、4μg、8μg时条带逐渐增大.与对照组相比,给予caspase-3后骨骼肌细胞总蛋白降解率增加36.9％,肌纤维蛋白降解率增加66.4％,给予DEVD后总蛋白降解率下降17.7％,肌纤维蛋白降解率下降27.7％.结论:caspase 3在体外可以降解肌动球蛋白复合体,而且还能改变骨骼肌蛋白降解率.caspase-3在骨骼肌蛋白降解中发挥了重要作用,参与了骨骼肌细胞的凋亡. 【总页数】4页(541-544)

【关键词】骨骼肌;蛋白代谢;细胞培养;凋亡 【作者】吴焱秋;柴家科;张海龙;耿祎楠