广藿香油对家兔内毒素性发热的作用 

广藿香油对家兔内毒素性发热的作用*

周彦希1, 2， 彭 成1,2△， 万 峰1,2， 曹小玉1， 肖丽萍1,2， 刘建林1,2， 贺 抒1,2， 杜巧辉1,2， 龚小红1,2

【摘 要】[摘 要] 目的： 探讨广藿香油对家兔内毒素性发热的解热作用及机制。方法: 根据实验当天体重及基础体温将42雄性只家兔随机分为7组，分别为空白对照组、模型对照组、西药阳性组、中药阳性组及广藿香油高、中、低(2%、1%和0.5%)3个剂量组。除空白对照组外，其余6组均按1 mL/kg经耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(2 mg/L)复制家兔内毒素性发热模型，0.5 h后经耳缘静脉给药，空白和模型对照组注射等量的0.5% 吐温80，西药、中药阳性组和广藿香油高、中、低剂量组分别注射对应剂量药物，观察各组家兔体温变化，采用放射免疫法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)和前列腺素E2(PGE2)的含量。结果: 与空白对照组相比，模型对照组家兔体温、IL-1β、TNF-α、cAMP和PGE2显著上升(P<0.01或P<0.05)；广藿香油对发热家兔的体温升高有明显的抑制作用，广藿香油高剂量组给药后1.5～5.5 h，家兔体温分别升高(1.06±1.55)、(1.62±1.36)、(1.38±1.22)、(0.98±0.98)和(0.48±0.95) ℃，广藿香油中剂量组给药后3.5～5.5 h，体温分别升高(1.47±0.73)、(1.15±0.68)和(0.63±0.54) ℃，广藿香油低剂量组给药后各时点均有降低发热家兔体温的趋势；广藿香油可明显抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量的升高，有降低血清中IL-1β和下丘脑中PGE2含量升高的趋势。结论: 广藿香油对家兔内毒性发热有显著解热作用，其机制可能与抑制血清中TNF-α和下丘脑中cAMP含量升高有关。

【期刊名称】中国病理生理杂志 【年(卷),期】2014(000)010 【总页数】4

【关键词】[关键词] 广藿香油； 脂多糖类； 解热药； 兔

广藿香油(patchouli oil)为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin (Blanco)Benth. 的干燥地上部分经水蒸气蒸馏提取的挥发油[1]，是广藿香的主要药用成分。该成分具有抗细菌[2]、刺激胃肠分泌[3]、抗真菌、抗病毒、抗疟原虫、保护肠屏障功能、调节胃肠运动功能、免疫调节、抗炎、镇痛、抗氧化、止咳化痰、镇吐等[4]广泛药理作用，但有关其解热作用尚未见报道。本教研室前期实验研究发现广藿香油具有广谱抗菌活性，并具有极强的抗菌效力。基于此，本实验复制大肠杆菌内毒素致家兔发热模型，观察广藿香油对家兔体温的影响，并测定家兔血清中内生致热原白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)含量及下丘脑中的中枢发热介质环磷酸腺苷(cAMP)和前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)含量，旨在探讨广藿香油对内毒素性发热家兔的解热作用及其解热机制。

材 料 和 方 法

1 材料、动物和实验分组

广藿香，购自湛江雷州市，经成都中医药大学中药鉴定教研室李敏老师鉴定，为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.的干燥地上部分，炮制后采用水蒸气蒸馏法提取广藿香油，使用时用0.5% 吐温80配成广藿香油乳。脂多糖(lipopolysaccharide, LPS; Sigma)；注射用赖氨匹林(lysine acetylsalicylate for injection, LAI;扬州一洋制药有限公司)；双黄连注射液

(Shuanghuanglian injection,SI;河南福森药业有限公司)；Rabbit cAMP ELISA Kit、Rabbit TNF-α ELISA Kit、Rabbit IL-1β ELISA Kit和Rabbit PGE2 ELISA Kit购自R&D。

电子天平(上海天平仪器厂，JA-2603)；OMRON电子体温计(欧姆龙有限公司，MC-347)；离心机(Thermo Scientific, Legend Micro 17R)；酶标仪(Thermo Scientific, Varioskon Flash)；电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械有限公司，101-3-BS-Ⅱ)；超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，KQ5200E型)。 雄性普通级家兔，体重(2.0±0.5)kg，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，许可证编号为SCXK(川)2008-11。将家兔于实验室饲养3 d，使其适应环境。分别在实验前2 d及实验当天晨测家兔肛温，选择3次肛温值在38.5～39.5 ℃之间，波动不超过0.5 ℃者用于实验。取实验当天晨测肛温为基础体温。根据实验当天体重及基础体温值均分为7组，分别为空白对照组、模型对照组、西药阳性组、中药阳性组及广藿香油高、中、低(2%、1%、0.5%)3个剂量组，每组6只。 2 方法

2.1 复制LPS致家兔发热模型 用无热原的生理盐水将精制的LPS稀释成2 mg/L，除空白对照组外，其余各组均按1 mL/kg经家兔左耳的耳缘静脉注射LPS。空白对照组按1 mL/kg耳缘静脉注射无热原生理盐水。

2.2 给药 LPS注射0.5 h后，按以下方式顺次经家兔右耳的耳缘静脉注射给药：空白对照组：0.5% 吐温80 1 mL/kg；模型对照组：0.5% 吐温80 1 mL/kg；西药阳性组：LAI 1 mL/kg；中药阳性组：SI 每只0.5～1 mL；广藿香油高、中、低剂量组：广藿香油乳高、中、低(2%、1%和0.5%)1 mL/kg。

2.3 体温测定 分别测定给药后0.5 h、1 h、1.5 h、2.5 h、3.5 h、4.5 h和5.5 h(相当于造模后1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、5 h和6 h)家兔的肛温，比较不同时点肛温与基础肛温之差值(ΔT)为体温变化的指标。

2.4 样品采集与检测 造模后3 h耳缘静脉取血3 mL，静止1～2 h，离心(1 400×g, 15 min)，取上清液，按试剂盒说明书测定IL-1β和TNF-α含量。于末次测量体温后，立即断头处死家兔，取出全脑，在冰浴下于视交叉与灰结节之间取出下丘脑，纵向切成2等份，取1份称重，放入盛有0.5 mL生理盐水的匀浆器中粉碎匀浆。将悬浮液倒入10 mL试管内(冰浴)，用0.3 mL生理盐水洗匀浆器并倒入悬浮液中，混匀静置5 min，离心(1 400×g, 15 min)，收集上清液，按试剂盒说明书测定cAMP和PGE2的含量。 3 统计学处理

数据用均数±标准差(mean±SD)表示，利用SPSS 17.0软件处理，采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 广藿香油对内毒素性发热家兔体温的影响

实验过程中，空白对照组家兔体温在正常范围内波动，模型对照组造模后各时点体温升高明显，与空白对照组比较有显著差异(P<0.01)。阳性组及给药组造模后各时点体温均升高，但升高度数均低于各时点模型对照组的体温升高度数。西药阳性组给药后0.5 h有明显的解热作用，与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)，其余各时点与模型对照组比较无显著差异。中药阳性组给药后1 h和2.5 h无明显的解热作用，其余各时点均有明显的解热作用，与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。广藿香油高剂量组从给药后1.5 h开始有明显的解

热作用，一直持续到给药后5.5 h，与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。广藿香油中剂量组给药后3.5 h开始有明显的解热作用，一直持续到给药后5.5 h，与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。这表明广藿香油对内毒素所致发热模型家兔有显著解热作用，见表1。

2 广藿香油对内毒素性发热家兔血清中IL-1β和TNF-α含量的影响

模型对照组家兔血清中IL-1β和TNF-α含量均明显高于空白对照组，与空白对照组比较均有显著差异(P<0.05)。西药阳性组和中药阳性组家兔血清中IL-1β和TNF-α含量均明显低于模型对照组(P<0.01或P<0.05)。广藿香油各剂量组家兔血清中IL-1β含量与模型对照组比较无显著差异，但均有降低IL-1β含量的趋势。广藿香油中剂量组家兔血清中TNF-α含量明显低于模型对照组(P<0.05)。这表明广藿香油可明显抑制内毒素致发热家兔血清中TNF-α含量的产生，见表2。

3 广藿香油对内毒素性发热家兔下丘脑中cAMP和PGE2含量的影响

模型对照组家兔下丘脑中cAMP和PGE2含量均明显高于空白对照组，与空白对照组比较均有显著差异(P<0.05)。西药阳性组和中药阳性组家兔下丘脑中cAMP含量均明显低于模型对照组，与之比较均有显著差异(P<0.05)。西药阳性组和中药阳性组家兔下丘脑中PGE2含量与模型对照组比较均无显著差异。广藿香油各剂量组家兔下丘脑中cAMP含量明显低于模型对照组，与之比较有显著差异(P<0.05)。广藿香油各剂量组家兔PGE2含量与模型对照组比较均无显著差异，但均有降低PGE2含量的趋势。这表明广藿香油可明显抑制内毒素致发热家兔下丘脑中cAMP含量的产生，见表3。

讨 论