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分光光度计校正原理与方法

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分光光度计校正原理与方法

点击次数:214 发布时间:2011-12-12

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利用随机附件中的镨汝滤光片(呈浅蓝色的一块),固有的特征吸收峰529.8nm,采用逐点测试法来进行。 2. 操作步骤:

(1) 开机后将波长设定为580nm,打开试样室盖,用一张名片大小的白纸贴在样品室左侧正中央,此时可看到一个长方形的黄色光斑(完后将白纸拿掉)。

(2) 将仪器设置为T档,波长设定为520nm,样品为空白,打开试样室盖,按▽/0%键使数显为000.0,然后关闭试样室盖,按△/100%键使数显为100.0。

(3) 将镨汝滤光片作为被测样品放入试样室,依次调波长520nm, 522nm, 524nm, 526nm, 528nm, 530nm, 534nm, 536nm,逐点读出并记录各自所测得的T%值,并建立表格。例如:

λ(nm) 520 T% 50.3 522 46.8 524 36.1 526 29.1 528 25.9 530 23.0 532 22.9 534 25.6 536 34.3 以上表格说明:

波长准确度=529.8-λT??最小值=529.8-532=-2.2nm 其中:镨汝滤光片的最小吸收峰值是529.8nm

本仪器的波长准确度是±2nm,现在为-2.2nm,所以需要校正。 3. 校正方法:

(1) 用小螺丝刀拧松波长调节轮二个固定螺丝,取下波长调节轮。 (2) 打开右侧面板。

(3) 将波长刻度盘与刻度指示片对齐于532nm,此时读数T为22.9。

(4) 将手固定住波长刻度盘转轴,将波长刻度盘上三个腰形空上的Φ3mm螺丝适量旋松,将波长刻度盘转至529nm,使之与刻度指示片对齐,然后旋紧三个Φ3mm螺丝,并进行波长调节轮的回复装配,完后重新进行测量实验。最终使仪器波长准确度=529.8nm-λT??最小值

≤±2nm。

注意:上述调整完全结束后,请再次将波长调至580nm,打开试样室盖,用一张小的白纸贴在样品室左侧正中央,观察是否有一个矩形的黄色光斑。若还有不清楚之处请与当地维修点电话联系。 分光光度计操作指南

在此仅介绍实验室常用的功能:具体功能参照《分光光度计使用说明书》。

实验室一般仅用来测定A(吸光度)。分光光度计开机后默认是T(透射比),需要按A/T/C/F键调到A。

此时打开试样室盖,数显为OVER。在试样室内放入空白样品,关闭试样室盖,数显会显示一个数字,此时需按△/100%键进行调零,数显显示为0.000。此时就可以放入样品进行测定。

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(2)仪器预热时应打开试样室盖,避免烧毁仪器。

(3)每次使用仪器后应对比色皿架进行清洁,防止样品对比色 皿架的腐蚀。 (4)为了避免仪器积灰和玷污,在停止工作的时间里,用防尘罩罩住仪器。同时放入数袋防潮剂,以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或者玷污,影响仪器日后使用。 (5)当仪器停止工作时,应关闭仪器电源开关,再切断电源。

(6)样品应小心倒入比色皿,体积约为比色皿体积的80~90%,比色皿在放入比色皿架之前应用滤纸或者吸水性较好的纸将比色皿外壁擦拭干净。

友情提示:在测定样品之前应比较两个比色皿的吸光度,两者应一致。

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分光光度计校正原理与方法

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