以KDR为启动子的双自杀基因系统诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究

以KDR为启动子的双自杀基因系统诱导结肠癌细胞凋亡的

实验研究

王朝阳1，黄宗海2

【摘 要】摘要：目的 研究以KDR为启动子的双自杀基因系统CDglyTK诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究。方法 用联合基因AdKDR－CDglyTK腺病毒转染表达KDR不同的人结肠癌细胞HCT116和LS174T，检测转染效率；RT－PCR检测双自杀基因CDglyTK的表达；用梯度浓度的前药5－FC及GCV处理，MTT法检测双自杀基因系统对HCT116和LS174T的细胞毒性作用；流式细胞术观察细胞凋亡变化；免疫组织化学法检测caspase－3蛋白的表达。结果 携带双自杀基因的重组腺病毒载体成功转染结肠癌细胞。RT－PCR结果显示：表达KDR的HCT116细胞能表达目的基因，而不表达KDR的LS174T细胞不表达目的基因。5－FC和GCV对转染腺病毒的HCT116有明显的细胞毒作用而对LS174T细胞不敏感。流式细胞仪结果显示：给予5－FC和GCV后HCT116细胞出现凋亡峰，G0／G1升高、S期下降。Caspase－3表达增强（P＜0．01）。结论 KDR启动子驱动的双自杀基因系统CDglyTK能特异性杀伤结肠癌HCT116细胞，KDR可作为结肠癌基因治疗的靶点，并通过增强caspase－3途径诱导细胞凋亡。 【期刊名称】中国实验诊断学 【年(卷),期】2013(017)003 【总页数】5

【关键词】KDR；启动子；结肠癌细胞；自杀基因

将自杀基因与化疗药物联合是目前主要的基因治疗策略，多种自杀基因已经进