C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分析

C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分

析

余源;葛爽;李明;刘阿倩;林志强;田喜凤

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2014(030)006

【摘要】目的 克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树.方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,利用限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ构建pET28a(+)-H3重组载体,转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导组蛋白H3表达,Western blotting鉴定表达,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H3组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析.结果 成功克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,同源比对结果显示C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因序列与美国WB株完全一致,但与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远.结论 C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树分析表明贾第虫H3组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早,本研究结果为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的实验资料. 【总页数】7页(568-574)

【关键词】C2株蓝氏贾第鞭毛虫;克隆;表达;同源性分析;分子进化树 【作者】余源;葛爽;李明;刘阿倩;林志强;田喜凤

【作者单位】河北联合大学生命科学学院,唐山 063000;河北联合大学生命科学学院,唐山 063000;河北联合大学生命科学学院,唐山 063000;河北联合大学生命