维生素Ｅ、β－环糊精包合物的制备工艺研究
摘 要：采用正交设计法对饱和水溶液法制备维生素E、β-环糊精包合物工艺中维生素E与β-环糊精的比例、包合时间、包合温度进行研究，以筛选出最佳制备工艺。
关键词：维生素E；β-环糊精；包合物
维生素E （VitE）为脂溶性维生素，在临床上有较广泛的应用，它能抑制体内自由基反应，促进RNA和蛋白质的合成及增加免疫功能，具延缓衰老作用。维生素E常采用胶丸剂，亦有将其加入到各种复合维生素制剂中的方法。近来有将维生素E制成乳膏剂外用，用于治疗老年性角化斑等皮肤病的报道[1]。VitE易氧化，在各种复合制剂和乳膏中不稳定，增加其稳定性可提高这类制剂的质量。采用复凝聚法制备VitE微囊，能提高稳定性，但制备工艺复杂[2]。制备VitE、β-环糊精（β-CD）包合物的方法有研磨法、饱和水溶液法等[3]。本实验使用饱和水溶液法制备VitE、β-CD包合物来提高其稳定性。
β-环糊精（简称β-CD），具有一个高0.79 nm，直径为0.60~0.65 nm的非极性筒状空腔，这种特殊的分子结构使β-CD可与其它极性相似，分子大小与其空腔相匹配的不同类型的分子形成包合物[4-5]，经包合后形成的包合物具有比客体分子更优良的性能。β-CD不但能够包合药物中的有效成分，同时其作为药物载体能够除去药物的异味，增加药物的溶解度，减少药物的挥发和氧化等，有利于提高其生物利用度[6-7]。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
材料：β- CD （国药集团化学试剂有限公司）；VitE （西南制药厂）；无水乙醇（分析纯）；苯二甲醇；微晶纤维素。仪器：UV-1810双光束紫外可见分光光度计（北京普析）；SK250H超声波清洗机（上海一恒）；电热恒温干燥箱（天津泰斯特）；78-1磁力搅拌器（江苏金坛市金南仪器厂）；超级恒温器。
1.2 实验方法
采用饱和溶液法将β-CD制成饱和水溶液，然后将VitE加入β-CD饱和溶液中。充分搅拌或不断振荡一定时间，使VitE被包合，然后过滤、洗涤、干燥即得。将析出的固体包合物滤过，再用适当的溶剂洗净、干燥，即得稳定包合物[8]。
2 实验部分
2.1 包合物最佳包合条件的选择
影响包合的主要因素：维生素E与β-CD的配比、搅拌时间、温度、乙醇的用量。应利用正交设计表进行试验，测定所得包合物中维生素E含量，然后分别按公式计算包合率的测定、回收率、包合物含量，从而确定因素主次与最佳水平，然后按照最佳包合工艺制备VitE-β-CD包合物，并测定收率、含量与回收率。
2.2 包合率的测定
精密称取一定量β-CD 与VitE包合物置于50mL容量瓶中，加少量无水乙醇超声振荡使之溶解，再加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取滤液5mL放入50mL 容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，在284 nm下测其吸光度A，代入线性方程得其浓度，然后计算包合率。
包合率（%）=C×50×10m×x×100%
x（%）=n1×473n1×473+n2×1135×100%
C－代入线性方程所得VitE浓度（μg/mL）
m－包合物质量（μg）
x－包合物中VitE 的质量百分数（%）
n1－包合前VitE的物质的量（mol）
n2－包合前β-CD的物质的量（mol）
1135、473分别为β-CD、VitE的相对分子质量。
2.3 包合物含量测定
2.3.1 波长选择
取VitE无水乙醇溶液和β-CD无水乙醇溶液，在200～400nm处进行光谱扫描，扫描速度1200nm/min， VitE在284nm处有最大吸收而β-CD没有，故测定波长设定为284nm[9]。 见图1。
2.3.2 标准曲线制备
精密称取VitE对照品约200mg，置于100mL容量瓶中，用无水乙醇配成浓度为2mg/mL对照品贮备液。分别精密量取1、2、3、4、5、6、7、8mL贮备液置于100mL容量瓶中，加无水乙醇至刻度，得到系列浓度的对照品溶液，分别于284nm处测定A值，求得回归方程为C=235.7A-2.3765；r=0.9975。VitE浓度在25~170ug/mL范围内线性关系良好。
2.3.3 回收率实验
精密称取VitE标准品53.8mg，用无水乙醇溶解并加入等量β-CD后用60%乙醇定容于50mL棕色容量瓶中，待溶解后测定吸收度，求得回收率为（100.2±0.68）%（n=4）。
2.4 稳定性实验
采用经典恒温法，对VitE、β-CD包合物进行了稳定性试验。测定了VitE、β-CD包合物在不同温度下，不同取样时间的药物含量，根据这些数据计算不同温度下的K值（见表1），用1gK对1/T回归，计算得到VitE包合物在室温20℃的K值为2.61×10-5，室温20℃贮存期为169天。
VitE在室温下密封避光保存，其含量稳定；当置于日光下，暴露于空气中时，因其氧化而使含量降低， VitE经包合后，稳定性大为提高。
3 结论
3.1 正交试验
为选择最佳试验条件而进行正交试验设计，见表2。
3.2 方差分析
以VitE利用率作指标，对正交实验结果进行直观分析，由各因素极差，确定因素主次及最佳水平，再以方差分析求得各因素的F值，最后确定A1B2C1为最佳包合工艺，即VitE与β-CD配比为1∶5，包合时间为4h，包合温度为50℃。见表4。
3.3 质量考察
3.3.1 外观
VitE、β-CD包合物成白色粉状。
3.3.2 薄层层析
将VitE、β-CD包合物及VitE分别配制成一定浓度的样品液及对照液，在经活化的硅胶GF254 薄层板上点样，以苯二甲醇（20∶1） 于20℃展开，凉干后，于254nm紫外光下检查，斑点位置相同，说明VitE包合后化学结构并无变化。
3.3.3 差热分析法
维生素E、β-环糊精包合物的制备工艺研究
