SIRT1对激活型小胶质细胞BV-2毒性损伤PC12细胞的
保护作用及机制研究
叶杰明;刘振华;谢惠芳;魏继鹏;陆伶俐;黄燕君
【期刊名称】《中华神经医学杂志》 【年(卷),期】2013(012)011
【摘要】目的 探讨沉默信息调控因子1(SIRTl)在激活型小胶质细胞介导PC12细胞损伤中所起的作用及相关机制. 方法 体外常规培养BV-2小胶质细胞和PC12细胞,ELISA检测1μg/mL脂多糖(LPS)作用BV-2细胞6、12、24 h后上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平;MTT检测LPS与BV-2细胞共培养上清对PC12细胞存活率的影响,同时设对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组;MTT检测SIRT1激活剂藜芦醇(5、10、25、50、100 μmol/L)、SIRT1抑制剂尼克酰胺(5、10、25、50 mmol/L)对PC12细胞存活率的影响,以筛选二者的干预浓度.实验分对照组、LPS+BV-2细胞共培养上清液组、白藜芦醇干预组、尼克酰胺干预组,分别加入培养基、LPS+BV-2细胞共培养上清液、50 μmol/L白藜芦醇、25 mmol/L尼克酰胺,培养18h后MTT检测4组细胞存活率,Western blotting检测细胞内SIRT1、乙酰化p53的表达水平. 结果 LPS作用BV-2细胞6、12、24 h后IL-6、TNF-α分泌量均依次增高,差异有统计学意义(P<0.05);MTT比色显示与对照组、LPS组、单纯BV-2上清液组比较,LPS+BV-2细胞共培养上清组PC12细胞存活率下降,差异有统计学意义(P<0.05);1 00μmol/L白藜芦醇组、50 μmol/L尼克酰胺组细胞存活率较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),因此选择50 μmol/L白藜芦醇、25 μmol/L尼克酰胺进行实验;与对照组比较,LPS+BV-2细胞共培养上清组细胞存活率降