② 保：将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。 3、冲洗涂片
① 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟； ② 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4、染色
① 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟； ② 吸：吸去多余染色剂； ③ 盖：盖上盖玻片。 5、观察
① 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； ② 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。
五、考点提示：
1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；
3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；
4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；
5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。
实验四：体验制备细胞膜的方法
一、实验原理：细胞膜的流动性和半透性
二、实验材料：猪（或牛、羊、人）的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水） 三、实验用具：蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤：
1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片 2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行，并持续观察细胞的变化。可以看到近水的部分红细胞发生变化；凹陷消失，细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流出。
五、考点提示：
1、选择动物细胞进行实验的原因：动物细胞无细胞壁。
2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因：人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器（膜），可以得到较纯净的细胞膜。
3、细胞破裂后，用什么方法获得较纯的细胞膜：将涨破的细胞溶液，经过离心分离得到细胞膜。
4、如何获得植物细胞膜：先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体；再将原生质体放入清水中，水自由扩散进入，原生质体涨破；最后经过离心分离得到植物细胞膜。 5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因：稀释后，可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。用生理盐水是为了保持渗透压，防止在稀释的时候就发生细胞破裂。
实验五：用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
一、实验原理：
- 6 -
1、叶肉细胞中的叶绿体，呈绿色、扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中，可以在高倍显微镜下观察它的形态。
2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中，健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
二、实验材料：新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为1%的健那
绿染液（将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解）
三、实验用具：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签 四、方法步骤： 1、观察叶绿体
低倍镜下找到叶片细胞→低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。
2、观察线粒体
染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。
五、考点提示：
1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因：藓类属于低等植物，叶片是绿色的单层细胞，不需加工即可进行观察。
2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因：保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中，否则，细胞失水收缩，将影响细胞器形态的观察。
实验六：植物细胞的吸水和失水
一、实验目的：
1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原。（与前面的知识：显微镜的使用联系） 2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响，掌握此种方法的具体应用。 3、通过观察植物细胞的吸水和失水，明确渗透系统的组成以及具体应用。
二、实验原理：
1、成熟的植物细胞放到一定浓度的溶液中构成一个渗透系统。当细胞大量失水时原生质层与细胞壁的伸缩程度不同，导致原生质层和细胞壁分离。
2、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度大于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和壁又复原。
三、实验材料：紫色特别深的洋葱外表皮、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液、清水 四、实验用具：显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸 五、方法步骤：
1、用刀片在洋葱鳞片叶的外表面划一个小方块，用镊子撕取这一小块洋葱表皮，在洋葱的外表皮上，用刀片划一些方块，用镊子轻轻撕取一小块（撕取的仅仅是外表皮，不要撕得太厚，仍然作为一个问题留给学生）。在取标本时，可以将洋葱的内表皮朝外，外表皮朝里进行对折，不要太用力，然后取其外表皮作为材料，将它平展地放在载玻片中央的清水滴中，并盖上盖玻片。
2、用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。
3、从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，洋葱表皮细胞就侵润在蔗糖溶液中。注意重复3-4次。
4、再用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。
- 7 -
5、从盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引，这样重复几次，洋葱表皮细胞就侵润在清水中。
6、还用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。
六、实验结论：
当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开；反之，当外界溶液浓度低于细胞液浓度时，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和细胞壁又复原。
实验七：比较过氧化氢在不同条件下的分解
一、实验目的：
通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢，了解过氧化氢酶的作用和意义
二、实验原理：
新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶，根据酶的专一性，可知其可以催化过氧化氢分解成水和氧。
三、实验材料：
质量分数为20%的猪肝研磨液，新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液，质量分数为3.5%的FeCl3溶液
四、实验用具：
量筒，试管，滴管，试管夹，试管架，卫生香，火柴，酒精灯，大烧杯，石棉网，温度计
五、方法步骤：
1、取4支洁净试管，分别编号1，2，3，4，向试管内分别加入2ml过氧化氢溶液。 2、将2号试管放在90℃左右的水浴中加热，观察气泡情况，并与1号试管作比较。
3、向3号试管内滴入2滴FeCl3溶液，向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液，观察哪支试管产生的气泡多。
4、2至3min后，将点燃的卫生香分别放在3、4号试管内液面的上方，观察哪支试管中的卫生香燃烧更猛烈。
六、实验结论：
1、加热能促进H2O2的分解,提高反应速率；
2、酶有催化作用，与无机催化剂相比，酶具有高效性。
实验八：影响酶活性的条件
一、实验目的：
1、初步学会探索影响酶活性条件的方法。
2、探索过氧化氢酶在不同温度和PH下催化过氧化氢水解的情况。
二、实验原理：
淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。麦芽糖和葡萄糖遇碘后，不形成紫蓝色的复合物，但能 与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
三、实验材料：
质量分数为2%的新配置的淀粉酶溶液，新鲜的质量分数为20%的猪肝研磨液， 质量分数为3%的可溶性淀粉溶液，新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液， 质量分数为5%的盐酸，质量分数为5%的氢氧化钠溶液，蒸馏水，冰水，热水， 碘液，斐林试剂
- 8 -
四、实验用具：量筒，试管，滴管，试管夹，三脚架，火柴，酒精灯，小烧杯，大烧杯，石棉网，温度计， 五、方法步骤：
一、温度对酶活性的影响
1、取三支洁净的试管，编上号1，2，3，并分别注入2ml可溶性淀粉液。 2、分别向1，2，3号三支试管中各注入1ml新鲜的淀粉酶溶液，摇匀，依次放入沸水，37℃左右的热水，冰水中，维持各自的温度5分钟。
3、分别向1，2，3号三支试管中各滴入一滴碘液，然后摇匀。观察并记录这三只试管中，溶液颜色的变化情况。 二、pH对酶活性的影响
1、取三支洁净的试管，编上号1，2，3，并分别注入1ml的新鲜的淀粉酶溶液。
2、依次向1号，2号，3号试管中注入蒸馏水，氢氧化钠溶液，稀盐酸各1ml并摇匀。 3、分别向1号，2号，3号试管中各注入2ml可溶性淀粉溶液，震荡摇匀。 4、将三支试管的下半部浸到37℃左右的温水中，保温5分钟。 5、向三支试管中各加入2ml斐林试剂，震荡摇匀。 六、实验现象：
一、温度对酶活性的影响
1号试管中的液体未变蓝，2号和3号试管中的液体变蓝，且2号试管蓝色比3号试管深。 二、pH对酶活性的影响
2号和3号试管中的液体未变蓝，1号试管中的液体变蓝。
七、实验结论：
1、在最适宜的温度和最适宜的ph条件下，酶的活性最高。 2、温度和ph偏高或偏低，酶的活性明显下降。
实验九：叶绿体中色素的提取和分离
一、实验目的：
1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 2、探索叶绿体中有几种色素。
二、实验原理：
1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
三、实验材料：
新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶），无水乙醇，层析液（由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。93号汽油也可代用），二氧化硅和碳酸钙。
四、实验用具：
干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml），天平。
五、方法步骤：
（1）称取5g绿色叶片并剪碎 提取色素 研钵→研磨→漏斗过滤→ （2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮 收集到试管内并塞紧管口
（1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时
- 9 -
到达滤液细线）
制滤纸条
（2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线
（1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 （2）干燥后重复划2-3次
（1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准） 纸上层析 （2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 （3）用培养皿盖盖上烧杯
观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）
最宽：叶绿素a； 最窄：叶绿素b；
相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。
六、考点提示：
1、二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护色素免受破坏；丙酮：色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素b（黄绿色）。
3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种，它们在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。
4、裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 5、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。
6、根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯1cm ，高出的部分做直角弯折。 7、滤纸上的滤液细线如果触到层析液，细线上的色素就会溶解到层析液中，就不会在滤纸上扩散开来，实验就会失败。
8、画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中 9、研磨要迅速、充分。a.因为丙酮容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。
实验十：细胞大小与物质运输的关系
一、实验目的：
通过探究细胞大小，即细胞的表面积与体积之比（即细胞的相对表面积），与物质运输效率之间的关系，探讨细胞不能无限长大的原因
二、实验原理：NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。
三、实验材料：3cm×3cm×6cm的含酚酞的琼脂块，质量分数为0.1%的NaOH溶液。 四、实验用具：塑料餐刀，防护手套，毫米尺，塑料勺，纸巾，烧杯。
- 10 -
高中生物实验大全（详） - 图文
