山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及耐药性分析
黄丽丽1,2，林裕胜2，江锦秀2，张靖鹏2，游 伟2，肖义军1，胡奇林2* 【摘 要】【目的】分离、鉴定福建省某养殖场病死山羊的病原，明确山羊病死原因，为山羊伪结核棒状杆菌病的防治提供科学依据。【方法】以无菌采集的病羊肺脏为材料，进行细菌分离纯化，鉴定分离菌株的形态特征及培养特性；提取菌株DNA，利用特异性引物和16S rRNA通用引物进行PCR，16S rRNA扩增片段送公司进行克隆测序并对序列进行分析；并进行生化、药敏和动物攻毒试验。【结果】该分离菌株在含10%脱纤维绵羊血的琼脂培养基上，生长成直径1 mm左右、中央凸起、乳白色、边缘不整齐、伴有β溶血环的菌落，在营养琼脂培养基上生长不良，在麦康凯琼脂培养基上不能生长。16S rRNA测序结果经NCBI在线软件Blast后显示与GenBank上的伪结核棒状杆菌的同源性高达100%；山羊伪结核棒状杆菌特异性PCR有目的扩增条带；生化试验结果与伯杰氏细菌鉴定手册中伪结核棒状杆菌相符，表明分离菌为山羊伪结核棒状杆菌，命名为FJ-PN。小鼠攻毒试验结果显示，小鼠腹腔与皮下注射0.3 mL含量为4×105CFU·mL-1的分离菌，在40 h内全部死亡；山羊攻毒试验结果显示，山羊经皮下注射2 mL、鼻腔接种1 mL含量为4×105CFU·mL-1的分离菌3 d后死亡。药敏试验结果显示该菌对克拉霉素、环丙沙星、青霉素、四环素、左氟沙星、氧氟沙星、庆大霉素高度敏感，对红霉素、氯霉素、氨苄西林、头孢噻肟、头孢西丁、利福平低度敏感，对链霉素、甲氧苄啶表现耐药。【结论】本研究分离到的1株细菌为山羊伪结核棒状杆菌，具有较强的致病性，且对抗生素表现出一定的耐药性，为该病的诊断和合理用药提供了理论支持。 【期刊名称】《福建农业学报》
山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及耐药性分析
