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填写《肥料正式登记表》 1.生产者基本资料
(1)生产者注册证明材料 (2)生产企业基本情况资料
(3)国外及中国港、澳、台地区产品补充在其他国家(地区)新登记使用情况 (4)其他需要补充的证明文件等材料 2.产品执行标准 3.产品标签样式 4.肥料效应示范资料
提交由农业部认定单位最近4年以内在2个以上(含)不同省完成并出具的示范试验资料。经济作物面积5亩以上、大田作物20亩以上,对照1-2亩。 肥料效应示范试验应包括以下资料
(1)田间示范试验肥料的样品报告。由省级以上经计量认证的肥料检验机构检测出具 (2)田间示范试验报告。报告应是与标签(说明书)标明的产品主要功效相对应的、经临时登记作物的天际示范试验结果
(3)作用方式和作用机制研究报告。根据申请者提供的产品资料情况,由农业部确定是否需要必须提交
(4)国外及中国港、澳、台地区产品在本国(地区)或其他国家(地区)新的肥效试验报告结果。
5.毒性报告 由农业部确定
6.残留试验及残留检测方法试验 7.肥料样品
由产品所在省级农业行政主管部门抽取成品肥料样品并封口 产品包装及标签 GB 18382-2001
要求:
1.菌种:安全、有效,由明确来源和种名
2.外观:粉剂应松散、无恶臭味;颗粒应无明显机械杂质、大小均匀、无腐败味 3.技术指标:NY 884-2004
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前 言 本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款,其余为推荐性条款。 本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录,附录B为资料性附录。 农用微生物菌剂 1 范围 本标准规定了农用微生物菌剂(即微生物接种剂)的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。 本标准适用于农用微生物菌剂类产品。 2 规范性引用文件(略) 3 术语和定义(略) 4 产品分类 产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型;按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。 5 要求 5.1 菌种 生产用的微生物菌种应安全、有效。生产者应提供菌种的分类鉴定报告,包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。生产者应提供菌种安全性评价资料。采用生物工程菌,应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。 5.2 产品外观(略) 5.3 产品技术指标 5.3.1 农用微生物菌剂产品的技术指标见表1,其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。 表1 农用微生物菌剂产品的技术指标 项 目 有效活菌数(cfu),亿/g(mL) a 剂 型 液 体 ≥ ≤ ≤ ≤ ≥ ≥ 2.0 3.0×10 66粉 剂 2.0 3.0×10 20.0 35.0 80 5.5~8.5 6 颗 粒 1.0 3.0×10 6霉菌杂菌数,个/g(mL) 杂菌率, % 水分,% 细度,% pH值 保质期,月 b10.0 - - 5.0~8.0 3 30.0 20.0 80 5.5~8.5 a 复合菌剂,每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g(mL);以单一的胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。 b 此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。 表2 有机物料腐熟剂产品的技术指标 专业知识 整理分享
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剂 型 液 体 ≥ ≥ ≥ ≤ ≥ ≥ 1.0 30.0 15.0 - - 5.0~8.5 3 粉 剂 0.50 30.0 15.0 35.0 70 5.5~8.5 6 颗 粒 0.50 30.0 15.0 20.0 70 5.5~8.5 项目 有效活菌数(cfu), 亿/g(mL) 纤维素酶活,U/g(mL) a蛋白酶活,U/g(mL) b水 分,% 细 度,% pH值 保质期,月 ca 以农作物秸秆类为腐熟对象测定纤维素酶活。 b 以畜禽粪便类为腐熟对象测定蛋白酶活。 c 此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。 5.3.2 农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。 表3 农用微生物菌剂产品的无害化技术指标 参数 粪大肠菌群数,个/g(mL) 蛔虫卵死亡率,% 砷及其化合物(以As计),mg/kg 镉及其化合物(以Cd计),mg/kg 铅及其化合物(以Pb计),mg/kg 铬及其化合物(以Cr计),mg/kg 汞及其化合物(以Hg计),mg/kg 6 试验方法 6.1 仪器设备(略) 6.2 试剂(略) 6.3 产品参数的检测 6.3.1 外观(感官)的测定
取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中,仔细观察样品的颜色、形状、质地。 6.3.2 有效活菌数的测定
采用平板计数法,根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。
若采用最大可能数(Most Probable Number,MPN)5管法,遵照附录C的规定。 6.3.2.1 系列稀释
称取样品10 g(精确到0.01 g),加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中),静置20 min,在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min,即成母液菌悬液(基础液)。
用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中,按1:10进行系列稀释,分别得到1:1×10,1:1×10,1:1×10,1:1×10……稀释的菌悬液(每个稀释度应更换无菌移液管)。 6.3.2.2 加样及培养
每个样品取3个连续适宜的稀释度,用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL,加至预先制备好的固体培养基平板上,分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
每一稀释度重复3次,同时以无菌水作空白对照,于适宜的条件下培养。 专业知识 整理分享
1
2
3
4
≤ ≥ ≤ ≤ ≤ ≤ ≤ 100 标准极限 95 75 10 100 150 5 WORD格式可编辑
6.3.2.3 菌落识别
根据所检测菌种的技术资料,每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时,检测结果无效,应重做。 6.3.2.4 菌落计数
以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准(丝状真菌为10~150个菌落数),分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度,其平均菌落数在20~300个之间时,则以该平均菌落数计算。若有两个稀释度,其平均菌落数均在20~300个之间时,应按两者菌落总数之比值决定。若其比值小于等于2应计算两者的平均数;若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式(1)或式(2)计算:
nm =
kv1/(m0v2) ×10 …………………(1)
nv =
kv1/(v0v2) ×10 …………………(2)
式中:
nm — 质量有效活菌数, 亿/g
nv — 体积有效活菌数, 亿/mL
— 菌落平均数, 个
-8-8
k — 稀释倍数
v1 — 基础液体积, mL v2 — 菌悬液加入量, mL v0 — 样品量, mL m0 — 样品量, g
6.3.3 霉菌杂菌数的测定
采用马丁培养基,测定方法同6.3.2。 6.3.4 杂菌率的测定
除样品有效菌外其它的菌均为杂菌。样品中杂菌率按式(3)计算:
m = n1/(n1+n)×100 …………………(3)
式中:
m — 样品杂菌率, %
6.3.5 水分的测定
将空铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h,冷却后称量记录空铝盒的质量。然后称取2份平行样品(颗粒型样品,应先粉碎过1.0 mm试验筛),每份20 g(精确到0.01 g),分别加入铝盒中并记录质量。将装好样品的铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。取出置于干燥器中冷却20 min后进行称量。水分含量按式(4)计算(结果为两次测定的平均值):
n1 — 杂菌数, 亿/g(mL) n — 有效活菌数, 亿/g(mL)
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w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100 …………………(4)
式中:
w — 样品水分含量, % m0 — 空铝盒的质量, g m1 — 样品和铝盒的质量, g m2 — 烘干后样品和铝盒的质量, g
6.3.6 细度的测定 6.3.6.1 粉剂样品
称取样品50 g(精确到0.1 g),放入300 mL烧杯中,加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔径0.18 mm的试验筛中,然后用水冲洗,并用刷子轻轻地刷筛面上的样品,直至筛下流出清水为止。将试验筛连同筛上样品放入干燥箱中,在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。冷却后称量筛上样品质量。样品细度按式(5)计算:
s ={1- m1/[ m0(1-w)]} ×100 …………………
(5)
式中:
s — 筛下样品质量分数, % m0 — 样品质量, g w — 样品含水量, % m1 — 筛上干样品质量, g
6.3.6.2 颗粒样品
称取样品50 g(精确到0.1 g),将两个不同孔径的试验筛(1.0 mm和4.75 mm)摞在一起放在底盘上(大孔径试验筛放在上面)。样品倒入大孔径试验筛内筛样品,然后称小孔径试验筛上的样品质量。颗粒细度按式(6)计算:
g = m1 /m0 ×100
…………………(6)
式中:
g — 样品质量分数, % m1 — 小孔径试验筛上样品质量,g m0 — 样 品 质 量, g
6.3.7 pH值的测定
打开酸度计电源预热30 min,用标准溶液校准。 pH值的测定,每个样品重复三次,计算三次的平均值。 6.3.7.1 液体样品
用量筒取40mL样品放入50 mL的烧杯中,直接用酸度计测定,仪器读数稳定后记录。 6.3.7.2 粉剂样品
称取样品15 g,放入50 mL的烧杯中,按1:2(样品:无离子水)的比例将无离子水加到烧杯中(如果样品含水量低,可根据基质类型按1:3~1:5的比例加无离子水),搅拌均匀。然后静置30 min,测样品悬液的pH值,仪器读数稳定后记录。 6.3.7.3 颗粒样品
样品先研碎过1.0 mm试验筛,按照6.3.7.2的方法测定。
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