CD4+和CD8+T淋巴细胞检测技术规范 1 范围
本章规定了CD4+和CD8+T淋巴细胞检测的意义、实验室要求、检测方法、结果报告及质量控制要求。适用于从事相关检测的各级艾滋病实验室。
2 规范性引用文件
《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》(中华人民共和国卫生行业标准,WS293-2008)
《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》(人民卫生出版社,2007年12月)
《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南(试行)》(中国疾病预防控制中心,2006年2月) 《病原微生物实验室生物安全管理条例》(中华人民共和国国务院令 第424号,2004年11月12日)
3 CD4+ 和CD8+T淋巴细胞检测的意义 3.1 HIV感染临床分期
CD4+T淋巴细胞数量可评价HIV感染者免疫状况,辅助临床进行疾病分期。我国《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标CD4+T)将WS293-2008(中华人民共和国卫生行业标准,准》
淋巴细胞值作为成人及15岁(含15岁)以上青少年HIV/AIDS临床分期标准的主要依据之一。
3.2 HIV感染儿童免疫抑制分级和治疗辅助指标
CD4+T淋巴细胞百分数可以作为儿童免疫抑制分级指标, 可以作为儿童临床治疗分期和辅助条件。 3.3 疾病进展监测
《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》推荐对无症状HIV感染者及CD4+T淋巴细胞计数高的感染者每六个月进行一次CD4+ T淋巴细胞计数检测,以评估疾病进展,判断预后状况。
3.4 机会性感染的风险评估
机会性感染是艾滋病患者死亡的主要原因,CD4+T淋巴细胞可评估HIV感染者机会性感染的风险,辅助判断是否进行预防性治疗(如当CD4+ T淋巴细胞<200/μl时,应给予抗肺孢子菌肺炎的预防性治疗。
3.5 抗病毒治疗适应症选择及疗效评价
《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》将CD4+T淋巴细胞数量作为是否开始抗病毒治疗的重要实验室指标之一,并规定治疗后定期检测CD4+T淋巴细胞数量,判断免疫系统恢复情况。
3.6 CD8+T淋巴细胞为抑制性/细胞毒性T细胞,HIV感染 比值下降。CD4/CD8细胞数量增加,导致CD8+T者.
4 CD4+ 和CD8+T淋巴细胞检测实验室要求 4.1 人员
淋巴细胞检测的人员CD8+THIV/AIDS进行患者CD4+和须具
有上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全培 训、检测技术、质量控制和仪器厂家提供的培训。 4.2 设施和设备样品准备区:生物安全柜、离心机、冰箱、恒温孵4.2.1 ~l、20μ~精确移液器(5μl50μl/箱水浴箱、旋转振荡器、 )。~μl1000μl、200μl200 4.2.2 样品检测分析区:流式细胞仪、打印机。 功能分区4.3
实验室原则上应分为样品准备区和样品检测区,各区的 功能为:)实验室要求,样品准备区应达到生物安全Ⅱ级(BSL-2 用于样品制备。 样品检测区用于制备好的样品在流式细胞仪上检测。
CD8+T常规CD4+ 和淋巴细胞检测的方法和程序5 5.1 样品采集、运输和接收 5.1.1 样品的采集选择合适的抗凝剂,用于血液学检测或流式细胞5.1.1.1 仪的免疫表型检测。
(1)用于血液学检测的抗凝剂:KEDTA或KEDTA抗凝23管,在血球分析仪生产商允许的样品采集时间范围内检测。 (2)用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂:K2EDTA、K3EDTA、酸性枸橼酸葡萄糖溶液(ACD)或肝素抗凝。一般
CD4和CD8T淋巴细胞检测技术规范
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