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(完整版)分子生物学期末复习试题及答案

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一、名词解释 分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动

RNA组学:RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。 增色效应: DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 减色效应: DNA复性时其溶液OD260降低的现象。

Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。

解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。

DNA复性:在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。

核酸分子杂交:在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。

基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的DNA序列。 断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在DNA上不连续排列而被不编码的序列所隔开。

重叠基因:核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因,或称嵌套基因。

致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。

基因冗余:由于一基因在个体中有若干份拷贝,当删除其中一个时,个体的表型不发生明显变化。 DNA重组:DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,又称为遗传重组或基因重排。

同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组,又称基本重组。

接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用(conjugation)。

转化作用:通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型,称为转化作用 (transformation)。

转导作用:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用

位点特异重组:位点特异重组(site-specific

recombination) 是由整合酶催化,在两个DNA序列的特异位点间发生的整合。 12-23规则:重组发生在间隔为12bp到23bp的不同信号序列之间,称为12-23规则。 转座子:(transposon)在基因中可以移动的一段DNA序列。 转座:由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。

克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。

DNA克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一DNA分子,也称基因克隆或重组DNA (recombinant DNA)。

基因工程:(genetic engineering)实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组DNA工艺学。 限制性核酸内切酶:(restriction endonuclease, RE)是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。

同功异源酶:来源不同的限制酶,但能识别和切割同一位点,这些酶称同功异源酶。

同尾酶:有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同,但切割DNA后,产生相同的粘性末端,称为同尾酶。

载体:为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。

复制:(replication)是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 半保留复制:(semi-conservative replication)DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 复制子:(replicon)DNA分子中能独立进行复制的单位称为复制子。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。 复制眼:(replication eye)DAN正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛,称为复制眼。 复制叉:(replication fork)复制一开始,复制起始点要形成一个特殊的叉型结构,是复制有关的酶和蛋白质组

装成复合物和新链合成的部位,这种结构称为复制叉。 开放阅读框:从mRNA 5¢端起始密码子AUG到3¢端终止密端粒:(telomere)指真核生物染色体线性DNA分子末端的码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一结构。 个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading 转录:(transcription) 生物体以DNA为模板合成RNAframe, ORF)。 的过程 。 顺反子:遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子不对称转录:(asymmetric transcription) 在DNA分子(cistron)。 双链上某一区段,一股链用作模板指引转录,另一股链不多顺反子:原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单转录;模板链并非永远在同一条单链上。 位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质,为模板链:DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA多顺反子(polycistron) 。 的一股单链,称为模板链(template strand),也称作有单顺反子:真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子意义链或Watson链。 (single cistron) 。 编码链:相对的另一股单链是编码链(coding strand),翻译的跳跃现象:翻译中读码框发生位移或核糖体跳过一也称为反义链或Crick链。 大段mRNA后 继续翻译称为翻译的跳跃现象。 启动子:RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子信号序列:(signal sequence)所有靶向输送的蛋白质结(promoter) 构中存在分选信号,主要为N末端特异氨基酸序列,可引转录泡:(transcription bubble)在转录延长过程中,导蛋白质转移到细胞的适当靶部位,这一序列称为信号序由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA列 。 三者结合在一起的复合体,为空泡状结构,又称转录复合信号肽:(signal peptide)各种新生分泌蛋白的N端有保物。 守的氨基酸序列称信号肽。 转录因子:能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA线粒体定向肽:由核基因组编码的线粒体外膜蛋白的N的蛋白质,现已发现数百种,统称为反式作用因子端具有的一段肽链。由富含带正电的氨基酸和丝氨酸、苏(trans-acting factors)。反式作用因子中,直接或间接氨酸等。 结合RNA聚合酶的,则称为转录因子(transcriptional 基因表达:(gene expression)基因经过转录、翻译,产factors, TF)。 生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。 转录后加工(RNA的成熟):在细胞内,由RNA聚合酶合操纵子:(operon)是原核生物在分子水平上基因表达调控成的原初转录物 的单位,由结构基因、启动子、操纵基因和调节基因组成;(pre-RNA)经过链的裂解、5`端与3`端的切除和特殊结通过调节基因编码的调节蛋白与诱导物、辅阻遏物协同作构的形成、核苷的修饰和糖苷键的改变、以及拼接和编辑用,开启或关闭操纵基因,对操纵子结构基因的表达进行等过程,转变为成熟的RNA分子的过程称为RNA的成熟或正、负控制。 转录后加工(post-transcriptional processing)。 转录衰减:(attenuation)是指转录可正常起动,但在转RNA编辑:改变RNA编码序列的方式称为 RNA编辑。 录进入第一个结构基因前即突然停止的过程。由于这一终密码子:(codon)代表一个氨基酸或蛋白合成、终止信号止作用并不能使正在进行的结构基因转录中途停止,而仅的核苷酸三联体。 是部分中途停止转录,所以称为转录衰减。

二、填空题:

1.分子生物学的发展分为三个阶段:人类对DNA和遗传信息传递的认识阶段,重组DNA技术的 建立和发展阶段,重组DNA技术的应用和分子生物学的迅猛发展阶段。

2.对DNA双螺旋结构的提出贡献最大的三位科学家是J.Watson, F.Crick, O.Avery。 DNA序列测定法有两种,分别为G:lbert化学法, sanger酶法。 4.PCR 仪的发明者为Kary B.Mullis。

5.核酸分子由碱基,戊糖,磷酸三部分组成。

6.在DNA双螺旋结构中,氢键维持双链横向稳定性,碱基堆积力维持双链纵向稳定性。 7.OD260=1.0相当于50ug/ml双链DNA,40ug/ml单链DNA,20ug/ml寡核苷酸。 8.DNA的密度为1.7g/cm3,相当于8M CSCL溶液的密度。 9.质粒PSC101中的P代表构建该质粒的研究者或单位。

10.DNA重组的种类同源重组,接合作用,转化作用,转导作用,位点特异的重组,转座。 11.基因工程中常用载体可分为三类质粒DNA,噬菌体DNA,病毒DNA。

12.同一基因获取的方法有四种化学合成法,cDNA文库,基因组DNA文库,聚合酶链式反应(PCR)。 13.重组DNA导入受体菌时,对受体菌的要求为安全宿主菌,限制酶和重组酶缺陷,处于感受态;导入方式有转化,转染,感染三种。

14.重组DNA技术操作过程可形象归纳为分,切,接,转,筛。

15.1958年Meselson等氮的同位素试验证明了DNA复制为半保留复制的机制。 16.复制的方向有单向复制,相向复制,双向复制。

17.参与DNA复制的物质有底物,聚合酶,模板,引物,其他的酶和蛋白质分子。 18.细菌的RNA聚合酶全酶的五个功能位点为α,β,β’,ω,σ。 19.真核生物的转录过程可分为识别,起始,延伸,终止四个阶段。 20.逆转录酶是一类非常复杂的酶,在其简单的一条多肽链上具有多种酶活性DNA聚合酶活性,RNA酶活性,DNA内切酶活性,DNA旋转酶活性,螺旋酶活性,tRNA结合酶活性。 21.遗传密码的特点有连续性,简并性,摆动性,通用性。

22.基因表达是受调控的,可在多个层次上进行,包括基因水平,转录水平,转录后水平,翻译水平,翻译后水平的调控。 三、翻译:

脱氧核糖核酸(DNA), 超螺旋(supercoil), 正超螺旋(positive supercoil),DNA-dependent DNA polymerase(依赖DNA的DNA聚合酶), 解螺旋酶(helicase),引物酶(primase), SSB(单链DNA结合蛋白), DNA ligase(DNA连接酶), telomerase(端粒) , cDNA(互补DNA), teminator(终止子), UBF(upstream binding factor)上游启动子结合因子, TBP(TATA box-binding protein)TATA框结合蛋白, downstream elements(下游启动子元件), TF(transeriptional factors)转录因子,

CTD(carboxyl terminal domain)羧基端结构域,

EB(溴化乙锭), IF(起始因子), EF(延长因子), RF(释放因子), molecular chaperon(分子伴侣) 四、简答题:

1.证明DNA是主要的遗传物质的两个重要实验是什么?

1944,O. Avery 肺炎双球菌转化实验 1952,A.D Hershey 和M. Chase 噬菌体感染实验 2.简述mRNA的结构特点和功能?

结构特点:1、大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化,形成帽子结构:m7GpppNm-。2、大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构,称为多聚A尾。

功能:把DNA所携带的遗传信息,按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。

3.简述tRNA一级结构的特点?

含 10~20% 稀有碱基,如 DHU;3′末端为 — CCA-OH;5′末端大多数为G;具有 TyC 4.简述tRNA的结构?

tRNA的二级结构——三叶草形(氨基酸臂;DHU环;反密码环;额外环;TΨC环) tRNA的三级结构——倒L形

5.简述原核生物和真核生物的rRNA的种类?

真核生物的种类有:5S rRNA,28S rRNA,5.8S rRNA,18S rRNA;原核生物的种类有:5S rRNA,23S rRNA,16S rRNA、

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