第六章 层析技术 - 图文 

? 苯基(或辛基)-Sepharose CL-4B ? 苯基(或辛基或烷基)-硅胶(或树脂)

基本原理：

在高离子强度的盐溶液淋洗下，蛋白质的疏水部分与填料表面的疏水基团相互作用而被吸附。淋洗液的离子强度降低，蛋白质依疏水性特征依次被洗脱。即高盐浓度吸附，低盐浓度洗脱。

一般而言，离子强度（盐浓度）越高，物质所形成的疏水键越强。

特征：

? 避免了使用大量有机溶剂的淋洗 ? 采用高盐时上样、低盐时洗脱 ? 洗脱条件温和---降低盐浓度

? 调整溶液的pH可调整该蛋白的疏水性。

第二节 分配层析技术

液-液层析法

原理：利用混合物在两种不相溶的液相（固定相和流动相）之间的分配系数的不同而达到分离各组分的目的。固定相液体均匀覆盖于载体表面，流动相流过固定相。

与薄层层析的区别？

?分配系数：在一定条件下，某种组分在流动相和固定相两相内的浓度之比是个常数，称为分配系数，用K表示

K=C1（固定相）/C2（流动相）

K值小表明溶质在流动相中的分配的数量多，移动快 ； K值大表明溶质在固定相分配的数量多，移动慢。