? 苯基(或辛基)-Sepharose CL-4B ? 苯基(或辛基或烷基)-硅胶(或树脂)
基本原理:
在高离子强度的盐溶液淋洗下,蛋白质的疏水部分与填料表面的疏水基团相互作用而被吸附。淋洗液的离子强度降低,蛋白质依疏水性特征依次被洗脱。即高盐浓度吸附,低盐浓度洗脱。
一般而言,离子强度(盐浓度)越高,物质所形成的疏水键越强。
特征:
? 避免了使用大量有机溶剂的淋洗 ? 采用高盐时上样、低盐时洗脱 ? 洗脱条件温和---降低盐浓度
? 调整溶液的pH可调整该蛋白的疏水性。
第二节 分配层析技术
液-液层析法
原理:利用混合物在两种不相溶的液相(固定相和流动相)之间的分配系数的不同而达到分离各组分的目的。固定相液体均匀覆盖于载体表面,流动相流过固定相。
与薄层层析的区别?
?分配系数:在一定条件下,某种组分在流动相和固定相两相内的浓度之比是个常数,称为分配系数,用K表示
K=C1(固定相)/C2(流动相)
K值小表明溶质在流动相中的分配的数量多,移动快 ; K值大表明溶质在固定相分配的数量多,移动慢。
第六章 层析技术 - 图文
?苯基(或辛基)-SepharoseCL-4B?苯基(或辛基或烷基)-硅胶(或树脂)基本原理:在高离子强度的盐溶液淋洗下,蛋白质的疏水部分与填料表面的疏水基团相互作用而被吸附。淋洗液的离子强度降低,蛋白质依疏水性特征依次被洗脱。即高盐浓度吸附,低盐浓度洗脱。一般而言,离子强度(盐浓度)越高,物质所形成的疏水键越强。
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