中华鳖Amh基因的克隆、表达及在雄性分化中的功能初探

中华鳖Amh基因的克隆、表达及在雄性分化中的功能初探

蔡晗[1];孙伟[1];刘豪彬[1];包海声[1,2];张海艳[1];钱国英[1];葛楚天[1];

【期刊名称】《中国科学》 【年(卷),期】2016(046)012

【摘要】为了阐明Amh基因在中华鳖雄性性别分化中的调控作用，本研究对Amh基因进行cDNA序列克隆和表达分析，同时通过慢病毒介导的RNA干扰技术对Amh基因进行了功能验证．RACE结果显示，中华鳖Amh基因的cDNA序列全长为3233bp，5’非翻译区为997bp，3’非翻译区为834bp，可读框为1401bp，编码466个氨基酸．实时荧光定量PCR结果显示，在成体组织中，Amh基因在睾丸中高度特异性表达；在胚胎发育过程中，Amh基因在性别分化启动前的第16期便开始呈现雄性特异性表达，并贯穿此后整个发育时期，而在雌性性腺中则维持非常低的表达水平．在芳香化酶抑制剂诱导的雌性向雄性性逆转胚胎性腺中，Amh表达显著上升；在雌二醇诱导的雄性向雌性性腺中，Amh表达则显著下降．RNA干扰实验表明，Amh基因敲低后，ZZ（基因型雄性）胚胎性腺外形和组织结构明显雌性化，皮质区发育，而髓质区高度退化，出现雄性转雌性的性逆转现象；同时雄性分化相关基因Sox9表达下调，而雌性分化相关基因Cyp19al表达则急剧上调．上述结果表明，中华鳖Amh是雄性特异性因子，在早期雄性性别分化过程中是必需的关键基因，本研究为中华鳖性别决定机制研究奠定了基础． 【总页数】11页(P.1423-1433)

【关键词】Amh 性别决定 性腺分化 雄性 中华鳖

【作者】蔡晗[1];孙伟[1];刘豪彬[1];包海声[1,2];张海艳[1];钱国英[1];葛楚天[1];