弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达
杨慧龄;肖建华;梁瑜;张愉快;刘传爱
【期刊名称】《中华预防医学杂志》 【年(卷),期】2003(037)001
【摘要】目的构建弓形虫ZS2株pWR450-1-微线体蛋白1(MIC1)原核表达重组质粒,对MIC1基因进行序列测定,并在不同大肠杆菌中表达.方法用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段,酶切,连接,重组入pWR450-1表达载体,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定,进行序列测序后转化大肠杆菌TG-1、JM109(DE3)和DH5α.在不同菌体浓度及不同剂量异丙基-β-D-硫代半乳糖诱导下,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定MIC1融合蛋白的表达.结果从ZS2株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段,克隆后获得pWR450-1/MIC1重组质粒,测序结果表明,MIC1这部分基因与弓形虫RH株相应基因序列完全一致,高度保守.该基因可在不同大肠杆菌中表达相对分子质量约70 000的融合蛋白.结论构建了弓形虫ZS2株pWR450-1-MIC1重组质粒,为研究MIC1的结构与功能奠定了基础. 【总页数】4页(29-32)
【关键词】弓形虫属;细胞黏附分子;克隆,分子 【作者】杨慧龄;肖建华;梁瑜;张愉快;刘传爱
【作者单位】421001,湖南衡阳,南华大学病原学研究中心;421001,湖南衡阳,南华大学病原学研究中心;421001,湖南衡阳,南华大学病原学研究中心;421001,湖南衡阳,南华大学病原学研究中心;421001,湖南衡阳,南华大学病原学研究中心 【正文语种】中文
【中图分类】R38 【相关文献】
1.弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序 [J], 杨慧龄; 肖建华; 梁瑜; 张愉快; 刘传爱
2.刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3的克隆与原核表达 [J], 苟惠天; 王艳华; 李文卉; 李航; 付宝权; 张德林
3.弓形虫微线体分泌蛋白TgMIC10基因的克隆、表达及鉴定 [J], 黄新明; 汪学龙; 沈继龙
4.弓形虫微线体蛋白MIC3基因的克隆及原核表达 [J], 江涛; 周艳琴; 刘琴; 聂浩; 姚宝安; 赵俊龙
5.弓形虫微线体分泌蛋白TgMIC10基因的克隆和序列分析 [J], 张松涛; 汪学龙; 沈继龙
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弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达
