DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳
腺癌组织中的表达
张伟红;张西臣;邢沈阳;李泽中;宫鹏涛;李建华;杨举;倪劲松
【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》 【年(卷),期】2012(038)003
【摘要】目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA (shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用.方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒.实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Westernblotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况.结果:成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒.PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组(P<0.05),DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多(P<0.05),DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多(P<0.05).免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100%(37/37);在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9%(7/37),两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞
增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润. 【总页数】7页(537-542,封3)
【关键词】DHRS7基因;过表达;干扰;细胞周期;乳腺肿瘤;MCF-7细胞 【作者】张伟红;张西臣;邢沈阳;李泽中;宫鹏涛;李建华;杨举;倪劲松
【作者单位】吉林大学白求恩医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室,吉林长春130062;吉林大学白求恩医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林长春130021
【正文语种】中文 【中图分类】R737.9 【相关文献】
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