农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子的研究

农杆菌介导的海岛棉茎尖再生体系及其遗传转化影响因子

的研究

翁琴;陈全家;孔庆平;张国政;武金玲;曲延英

【期刊名称】《新疆农业大学学报》 【年(卷),期】2007(030)004

【摘要】采用根癌农杆菌LBA4404和 EHA105介导,对海岛棉的茎尖再生体系及其转化影响因子进行了研究.茎尖培养与棉花体细胞胚胎发生相比,不同基因型的茎尖再生频率差异不明显;在9种不同的激素组合中,以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L与1/2MSB5+IBA 0.1 mg/L对茎尖的再生效果较好;获得较高转化频率的海岛棉培养条件为:海岛苗茎尖在OD600值为0.6～0.8农杆菌菌液中感染20～30 min,共培养3 d后进行转接,在含有不同激素和抗生素的各类培养基中进行抑菌和筛选继代培养,选择压以50～150 mg/L梯度进行;农杆菌以EHA105菌株的转化效果较好;抗性苗用SDS-CTAB法提取其总DNA,进行PCR扩增检测,有7株PCR检测呈阳性反应.由此,初步证明外源抗虫基因已经进入到再生植株的细胞核中. 【总页数】5页(63-67)

【关键词】海岛棉茎尖;遗传转化;根癌农杆菌;BT基因 【作者】翁琴;陈全家;孔庆平;张国政;武金玲;曲延英

【作者单位】新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农科院,经济作物研究所,乌鲁木齐,830000;新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,农学院,乌鲁木齐,830052