性别差异对1型糖尿病大鼠造模的影响

性别差异对1型糖尿病大鼠造模的影响

赵圆宇，王艺蓉，徐彩婷，赵 丰，莫琳龙，胡林均，施 蕾，李生玉，卢营杰，陈科利，张露丹，马亚洪，谭 敏

【摘 要】【摘 要】目的：采用大剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)一次性腹腔注射诱导方法建立1型糖尿病大鼠模型，研究性别差异对SD大鼠造模的影响。方法：SD大鼠118只(雌雄各59只)，分为雄性对照组(13只)，雄性STZ注射组(46只)，雌性对照组(13只)，雌性STZ注射组(46只)。每只大鼠称重、标记、剪尾取血后用血糖仪测血糖，STZ注射组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ，对照组大鼠一次性腹腔注射等体积枸橼酸盐溶液。分别检测每只大鼠给药后7 d和49 d的空腹血糖值和体重，记录并统计雌性和雄性大鼠成模率及成模后死亡率。结果：与对照组大鼠相比，STZ注射后成模大鼠血糖值显著性升高，雄性与雌性模型大鼠均出现“三多一少”症状。与雌性大鼠相比，雄性大鼠STZ注射后，成模率无显著性差异，而成模后死亡高峰期提前以及死亡率显著性升高。结论：用一次性大剂量STZ诱导SD大鼠建立1型糖尿病模型，雌、雄性大鼠成模率无性别差异，而成模后死亡率出现显著的性别差异。因此在采用SD大鼠进行糖尿病发病机制及其并发症的研究中，应考虑性别因素对研究结果的影响，从而选择双性别。 【期刊名称】川北医学院学报 【年(卷),期】2014(000)005 【总页数】4

【关键词】【关键词】1型糖尿病；性别差异；链脲佐菌素；成模率；死亡率 随着生活水平的提高，人们的营养状况和饮食结构有了大幅度的转变[1]：在营

养不良的情况得到较大改善的同时，营养过剩及其带来的相关疾病成为新的课题。2013年，全球范围内约有3.82亿人患糖尿病，占世界成人总人口的8.3%[2-3]。糖尿病(diabetes mellitus,DM)已成为继心血管疾病和肿瘤之后的第三大非传染性疾病[4]，严重危害人类健康，但糖尿病的发病机制及其并发症尚未完全阐明。因此选取正确的糖尿病动物模型对研究糖尿病发病机制及其并发症具有重要的意义。

链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对胰岛β细胞具有选择性毒性，是公认的糖尿病动物模型造模药物[5-6]。以往的研究显示：大鼠的品种、周龄、STZ剂量等因素直接影响造模的结果[7-9]。王晓琳等人的研究表明：雌性Wistar大鼠可以利用25 mg/kg STZ加膳食诱导方法建立2型糖尿病模型，而雄鼠不能[10]。此外，有报道表明雌激素对糖尿病病程的发展有延缓作用[11]，且在糖尿病模型中发现雄性鼠的糖代谢紊乱程度大于雌性鼠[12]。近年来越来越多的专家提出动物性别也是影响造模的重要因素之一。但大多数研究人员仅采用雄性大鼠来研究糖尿病的发病机制及其并发症，不能准确区分雌雄大鼠性别差异对STZ成模鼠发病机制及并发症的影响。为明确性别因素对糖尿病大鼠造模的影响，本实验采用同一批次的雌性和雄性SD大鼠，60 mg/kg一次性腹腔注射诱导建立1型糖尿病大鼠模型[13-14]，探究在相同高剂量STZ作用下，雌雄大鼠性别背景差异对造模成模率以及成模后死亡率的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

SPF级成年健康SD大鼠118只，4月龄，雌、雄各60只，体质量为210～280 g。由川北医学院动物研究所提供(动物合格证号SYXK(川)2013-076)。选

择符合模型纳入标准的动物分组进行实验，雌、雄性大鼠分别随机分为雄性对照组(13只)，雄性STZ注射组(46只)，雌性对照组(13只)，雌性STZ注射组(46只)。所有动物均喂养于川北医学院动物研究所提供的SPF级动物实验室，实验前动物适应性饲养3 d。各组大鼠实验期间均用标准颗粒饲料、标准笼喂养,高压灭菌自来水自由饮用。自然昼夜照明，室内通风良好，氨浓度<20 ppm，相对湿度为45%～65%，室温保持在20～25 ℃。 1.2 造模方法

将STZ以0.1 mol/L(pH=4.2)的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液溶解。STZ注射组按60 mg/kg一次性腹腔内注射，对照组一次性腹腔内注射等量缓冲液。部分动物STZ注射一周内出现死亡：雌性大鼠死亡5只，雄性大鼠死亡2只。STZ注射前、STZ注射后7 d和49 d动物禁食、不禁水8 h，称重后剪尾取血，用血糖仪及配套试纸检测其血糖值。空腹血糖≥16.7 mmol/L作为模型纳入标准[15-16]。记录并统计死亡动物数。 1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件,体质量以SD表示。模型对照组与给药组间的比较采用方差分析,方差分析有意义时采用LSD法进行组间两两比较;方差齐性检验(P<0.05)时,采用单因素方差分析。

2 结果

2.1 一般状况

造模早期大鼠基本状态较好，皮毛较清洁，活动正常。随着病程进展，成模组大鼠逐渐出现多饮、多尿、多食、消瘦、皮毛失去光泽、脱毛、活动减少和伤口易感染等表现，部分成模大鼠有血尿出现。