结核分枝杆菌抗酸染色法影响因素分析
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石的诊断准确率也会逐步提高. 参考文献
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结核分枝杆菌抗酸染色法影响因素分析 汤思萍黄一汝吴灿张维朱萍
(湖州师范学院医学院,浙江湖州313000)
【摘要】目的探讨结核分枝杆菌抗酸染色效果的影响因 素.方法将卡介苗涂片放于不同温度和不同时间下的恒温水 浴箱中进行初染,经脱色,复染后,采用显微镜观察染色效果. 结果染色温度为70℃,染色时间为5min时,结核杆菌染色 更鲜艳,背景清晰.结论加热时间与加热温度是影响抗酸染
色法染色效果的重要因素.
【关键词】分枝杆菌结核病抗酸染色卡介苗
近年来,由于耐药结核病的发生与传播,高感染人群或高 危人群的流动或移民以及对结核病控制放松等因素,全球结核 病疫情呈现回升趋势ll】.结核杆菌细菌学检查是确定结核病诊 断和化疗方案的重要依据,也是考核疗效,评价治疗效果的可 靠标准.传统的抗酸染色法是结核杆菌细菌学检查的常用方 法,该染色方法在染色时间以及温度上不易控制.本文旨在探 讨该染色方法的最适温度及染色时间,以便改进结核杆菌染色 效果.现报告如下. 1材料与方法
1.1材料本实验所用卡介苗为成都生物制品研究所产 品,痰标本为本室制作并保存,萋一纳氏抗酸染色液为杭州天 和微生物试剂公司产品.
1.2模拟痰标本结核杆菌抗酸染色将卡介苗用2mL生 理盐水稀释,充分混匀后取适量卡介苗稀释液加入到正常人痰 液中,混匀后涂片,按照以下方法进行染色:制作模拟痰标本涂 片,固定后分别滴加石炭酸复红染液,将其放入恒温水浴箱的 传热铝板上,分别在50,60,70,80,85℃温度下加热3,5, 10rain;再加盐酸酒精脱色1rain,流水冲洗;加美蓝染液复染 30s流水冲洗,待干后用显微镜油镜观察细菌的染色性和形 态.染色结果判断:(++),结核杆菌呈亮红色,结核杆菌数 基金项目:湖州师范学院大学生科研项目(XsKY2009041J 作者简介:汤思萍,女,20岁,本科在读,就读于湖州师范学院医学 院.E-mail:tang.siping@163.com
目≥1O条/视野,背景色较淡,对比度清晰;+,结核杆菌呈亮 红色,3条/视野≤结核杆菌数目<10条/视野;一,结核杆菌呈 红色,结核杆菌数目<3条/视野. 2结果
结核杆菌模拟痰标本在不同温度和时间下的抗酸染色效 果表明,在染色温度为70qC,染色时间为5min的条件下,结核 杆菌染色阳性率高,染色鲜艳,对比度好,背景清晰.见表1 表1染色温度和时间对结核杆菌染色效果的影响 3讨论
抗酸染色法是结核杆菌细菌学检查的常用方法脚,其特点 为快速,简便,实用.检出时间短,对器械要求不高,一直被基层 医院使用,医学院校在教学过程中也广泛应用该方法.但该方 法的染色温度及时间不容易掌握,在开放空间进行,有传染风 险.本文采用卡介苗来替代结核杆菌进行抗酸染色影响因素研 究,有效地降低了结核杆菌的传染风险.
传统的抗酸染色试验采用酒精灯加热,难以精确控制染色 温度.本文采用水浴加热来代替酒精灯加热,避免了酒精灯火 焰温度过高带来的染液蒸发过快干涸和受热不均等问题,保证 了染色效果.本文结果也显示了水浴加热方式能改进结核杆菌 抗酸染色效果,在染色温度为70℃,染色时间为5min的条件 下,结核杆菌染色阳性率高,染色鲜艳,对比度好,背景清晰.提 示:对临床痰标本进行抗酸染色法检查时,需要注意染色温度 和时间对染色效果的影响,采用上述染色条件,有助于获得良 好的染色效果.
350基层医学论坛2010年第l4卷4月上旬刊 ■囤强目嘧扇
致谢:本文得到邵圣文老师的悉心指导,谨表诚挚谢意. 参考文献
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结核分枝杆菌抗酸染色法影响因素分析
