江西***药业股份有限公司GMP文件
检验操作规程
题目：吴茱萸原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20440-02 制定人： 制定日期2020 年 月 日 版本：2 页数：1/4 审核人： 审核日期2020 年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期2020年 月 日 生效日期2020 年 月 日 目的：规范吴茱萸原药材检验操作 范围：吴茱萸原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2020年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量:本品呈球形或略呈五角状扁 球形，直径2～5mm。表面暗黄绿色至褐色，粗糙，有多数点状突起或凹下的油点。顶端有五角星状的裂隙，基部残留被有黄色茸毛的果梗。质硬而 脆，横切面可见子房5室，每室有淡黄色种子1粒。气芳香浓郁，味辛辣 而苦。 【鉴别】 3 （1）显微鉴别 3.1 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。 3.1.1 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：（1）本品粉 3.1.3 末褐色。非腺毛2～6细胞，长140～350μm，壁疣明显，有的胞腔内含棕 黄色至棕红色物。腺毛头部7～14细胞，椭圆形，常含黄棕色内含物；柄2～ 5细胞。草酸钙簇晶较多，直径10～25μm；偶有方晶。石细胞类圆形或长 方形，直径35～70μm，胞腔大。油室碎片有时可见，淡黄色。 (2)薄层鉴别 3.2 3.2.1 仪器与试剂：分析天平、数显恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱、层析缸、硅胶G 薄层板、石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯、乙醇、三氯甲烷、三乙 胺、吴茱萸次碱对照品、吴茱萸碱对照品等。 方法：（2）取本品粉末0.4g，加乙醇10ml，静置30分钟，超声处理3.2.2 30分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取吴茱萸次碱对照品、吴茱萸 碱对照品，加乙醇分别制成每1ml含0.2mg和1.5mg的溶液，作为对照品 溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别 点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-三乙胺（7： 3：0.1） 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 【检查】 4 杂质 不得过7%（通则2301）。 4.1 仪器：分析天平、药筛。 4.1．1 方法：取本品适量,挑拣果核、果梗，合并称重杂质量。 4.1.2 4.1.3 计算公式: M1 杂质量= ×100% M 0 第 1 页 共 4 页 江西***药业股份有限公司GMP文件
4.2 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.3 4.3.1 4.3.2 4.3.3 4.4 4.4.1 4.4.2
式中: M0-------供试品重(g) M1-------杂质重(g) 水分 不得过15.0%（通则0832第二法）。 仪器：电热鼓风干燥箱、分析天平、等。 方法：取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100－105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中的含水量（%）。 计算公式： W样+W0－W1 样品含水量% = ×100% W样 式中： W0 ---------------------------- 称量瓶的重量（g）。 W1 --------------------------- 称量瓶与样品的重量（g）。 W样 --------------------------- 样品的重量（g）。 总灰分 不得过10.0％（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得过150mg/kg 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L)等。 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两 第 2 页 共 4 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
4.4.3 5 5.1 5.2 5.3 6 6.1 6.2 6.3
颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： （V供-V空）×C×0.032×106 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g。 【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于30.0%。 仪器与试剂：电热鼓风干燥箱、分析天平、蒸发皿、数显恒温水浴锅、乙醇等。 方法：取供试品约2～4g，称定重量，置100～250ml的锥形瓶中，精密加入稀乙醇50～100ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量（%）。 计算公式： （W1-W0）×V0 浸出物% = ×100% W样×（1－水分）×V1 式中： W0 ------- 蒸发皿的重量（g）。 W1 -------- 浸出物与蒸发皿的重量（g）。 W样------- 样品的重量（g）。 V0------- 加溶媒体积 （ml）。 V1------- 取续滤液的体积 （ml）。 【含量测定】 照高效液相色谱法（通则0512）测定。本品按干燥品计算，含吴茱萸碱（C19H17N3O）和吴茱萸次碱（C18Hl3N3O）的总量不得少于0.15%，柠檬苦素（C26H30O8）不得少于0.20%。 仪器与试剂：高效液相色谱仪、超声波清洗仪、数显恒温水浴锅、、甲醇、乙腈、四氢呋喃等。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以 第 3 页 共 4 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
6.4 6.5 6.6 6.7
[乙腈-四氢呋喃（25：15）]-0.02%磷酸溶液 （35：65）为流动相；检测波长为215nm。理论板数按柠檬苦素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取吴茱萸碱对照品、吴茱萸次碱对照品、柠檬苦素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含吴茱萸碱80μg和吴茱萸次碱50μg、柠檬苦素0.1mg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，称定重量，浸泡1小时，超声处理（功率300W，频率40kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含吴茱萸碱（C19H17N3O）和吴茱萸次碱（C18Hl3N3O）的总量不得少于0.15%，柠檬苦素（C26H30O8）不得少于0.20%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 m ------------------------- 样品的重量（g）。 第 4 页 共 4 页
YL-20440吴茱萸原料检验操作规程
