1.铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：
原球茎长芽长根
新生营养芽―→――→丛状苗――→幼苗
?类似愈伤组织?
请回答以下问题：
(1)选用新生营养芽为培养材料的原因是_______________________________，原球茎细胞的细胞壁______(填“厚”或“薄”)。
(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光各自的作用，进行了对照实验，结果如下：
培养条件 光 暗
根据以上实验结果，下列说法正确的是________。 A.光为生长提供能量，蔗糖促进细胞分化
B.整个组培过程中，培养基中都不用加入蔗糖也可发育成幼苗 C.光照只会影响到光合作用的效率
D.蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化
(3)生物碱属于铁皮石斛的________代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过________悬浮培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。
答案 (1)分裂旺盛，全能性容易表达 薄 (2)D (3)次生 液体
解析 (1)新生的芽幼嫩，分裂能力强，全能性易表达，植物组织培养过程中一般选用新生营养芽为培养材料。原球茎细胞类似愈伤组织，由于愈伤组织是一团未分化的薄壁细胞，因此，原球茎细胞的细胞壁薄。(2)通过对比加蔗糖条件下，有光组能够正常分化，无光组无法发生分化，说明光能促进细胞分化；比较不加蔗糖条件下，有无光照均死亡，说明蔗糖为生长提供能量。若保证组培正常，需要加入蔗糖，故A、B、C错误，D正确。(3)生物碱属于铁皮石斛的次生代谢产物，获取方法可以从植株中提取，也可以通过液体悬浮细胞培养，将愈伤组织(原球茎)分散成单细胞，然后通过培养特定细胞系实现工业化生产。
2.利用废弃的秸秆生产燃料乙醇，不仅缓解了资源危机、环境污染，同时更为可持续发展提供了保证。下面是利用玉米秸秆来生产乙醇的流程：
预处理微生物1微生物2
玉米秸秆―――→纤维素―――→葡萄糖―――→乙醇 发酵发酵
(1)从纤维素丰富的土壤中获取微生物1，进行一系列的操作后，用________________将菌种
加蔗糖 正常生长，分化 只生长，不分化 不加蔗糖 不生长，死亡 不生长，死亡 1
涂布在相应的固体培养基中。
(2)下列有关涂布分离法的叙述，错误的是________。 A.从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液 B.接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃 C.培养后菌落在整个平板表面分散均匀 D.涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落
(3)为了提高生产效率，也可通过培养微生物1获得____________酶，并将该酶固定在某介质上制成固定化酶。
(4)微生物2通常是________________，为了确保获得产物乙醇，接种微生物2时要注意避免________，发酵时要注意________。发酵获得的低浓度乙醇经过蒸馏、提纯等加工，才可以得到浓度大于90%的燃料乙醇。
答案 (1)玻璃刮刀 (2)A (3)纤维素 (4)酵母菌 杂菌污染 无氧
3.(2018·金华十校期末调研)回答与“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”有关的问题：
(1)在酶的固定化时，共价偶联法比吸附法对α-淀粉酶活性的影响更________(填“大”或“小”)。
(2)实验室常用枯草芽孢杆菌来制备α-淀粉酶，枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶的最适pH范围是______________。
(3)在固定化α-淀粉酶水解淀粉作用的检测实验中，固相淀粉酶水解淀粉的鉴定实验结果为：①淀粉溶液加指示剂呈蓝色；②____________________加指示剂呈红色。
(4)枯草芽孢杆菌也是制备蛋白酶的良好原料，为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产菌株，将分别浸过不同菌株(a～e)的分泌物提取液及无菌水(f)的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37 ℃恒温箱中放置2～3天，结果如下图。若需要保存a菌株，可将其接种至斜面上，培养后置于________中保存。菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因：
①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。
答案 (1)大 (2)5.5～7.5 (3)亲和层析洗脱液 (4)4 ℃冰箱 ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足 ②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足 ③分泌的蛋白酶活性低(任意答出两点)
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4.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。
(1)图中选择培养基应以______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加______作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变____色。
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是_____________，每克土壤样品中的细菌数量为________×10个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。 答案 (1)尿素 酚红 红 (2)涂布分离法 1.75 少
解析 (1)脲酶由分解尿素的细菌产生，故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，故培养基中加入酚红指示剂后，菌落周围将出现红色。(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数，在计数时一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。因培养基上两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计结果往往较实际数目少；而用血细胞计数板计数时，死亡的、活的菌体都计数在内。
5.(2018·湖州、衢州、丽水教学质量检测)猕猴桃是人们非常喜爱的一种水果，人们不仅直接食用猕猴桃，还对其进行深加工，制成猕猴桃果汁、果酒等。下图为生产猕猴桃果汁和果酒的流程示意图，请回答下列问题：
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(1)在生产猕猴桃汁的流程中，为了提高出汁率，可在压榨前加入一定量的____________处理1小时。
(2)猕猴桃汁在保藏期的某一阶段会产生酚类物质导致果汁褐变或二次浑浊，后来人们发现，漆酶能有效降解酚类物质，使果汁澄清。将漆酶应用于果汁澄清的过程中，可采用交联法固定该酶，固定化酶技术的优点是__________________________________________。工业上固定化酶的方式较多，除上述方法外，还有吸附法、________________、共价偶联法等。 (3)制作好的果汁也可继续用于猕猴桃酒的生产。在进行发酵前需要在猕猴桃汁中接入的菌种是__________，同时添加适量蔗糖，主要目的是________________________________。在发酵时，当出现________________现象，即表示发酵完毕。
(4)当主体发酵结束后，需将上层“酒液”转移到另一灭菌容器中进行后续贮藏，此时为了防止醋酸菌污染，加入容器中“酒液”的量应为________(A.注满 B.2/3 C.1/3 D.无特殊要
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(浙江选考)高考生物二轮专题复习加试非选择题综合应用特训第32题1生物技术实践(A)
