桂枝提取物抑菌活性研究

桂枝提取物抑菌活性研究

周梦娇，万春鹏，陈金印* （江西农业大学农学院，江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室，江西南昌330045）

【摘 要】以柑橘青、绿霉菌及猕猴桃灰霉菌等17种植物病原菌为指示菌，分别采用杯碟法、菌丝生长速率法对桂枝提取物的抑菌活性进行研究，结果表明桂枝提取物具有较广泛的抑菌谱，对这17种供试病原菌均表现出一定的抑制效果，其中对柑橘青、绿霉的抑菌圈大小分别为（32.67±0.23）mm和（30.50±0.17）mm，最小抑菌浓度（MIC）分别为3.125mg/mL和6.25mg/mL，最小杀菌浓度（MFC）分别为6.25mg/mL和12.5mg/mL，而在其他15种植物病原菌中，桂枝提取物对车前草穗枯菌的活性最强，半抑制浓度（EC50）为0.4386mg/mL，对其他病原菌的EC50为1～22mg/mL。 【期刊名称】食品工业科技 【年(卷),期】2014(035)012 【总页数】3

【关键词】桂枝，植物病原菌，抑菌活性

植物病害是农业生产活动和采后贮藏最主要的瓶颈之一，据联合国粮农组织（FAO）统计，每年因植物遭受病害造成的减产平均损失为总产量的10%～15%[1-2]。目前植物病害防治主要依靠化学杀菌剂，但其残留量大，对人和环境都有很大的危害，且使用的持续性及普遍性导致很多植物病原菌产生抗药性[2]，随着人类“回归自然”的呼声越来越高，国际社会把目光转向了高效、低成本、低毒、低残留、不易产生抗性的天然植物提取物，如艾蒿、连翘、丁香、苦参等植物提取物因其具有较强的抗氧化性及抑菌效果，被广泛应用于食品防

腐剂、抗氧化剂、果蔬贮藏保鲜剂、生物农药等方向[3]。我国中草药资源丰富，大部分中草药在中药领域具有广泛研究应用，但只有少部分于植物病害防治方面得到了探究，因而亟需扩大中草药提取物及植物病原菌的筛选范围。 桂枝（Ramulus cinnamomi）是樟科（Cinnamonum）常绿乔木植物肉桂（Cinnamomum cassiaPresl.）的干燥嫩枝，主要分布在广西、广东、云南、福建和海南等地，其性味辛、甘、温，有发汗解肌、温经通脉之功效，中医多用于治疗风寒感冒、脘腹冷痛和关节痹痛等症[4]，是一种运用极其普遍的中药，具有较好的抑菌[5]、抗病毒[6]、抗氧化[7]和抗过敏[8]等药理作用。目前对桂枝的研究多局限于医药方面，而将其运用于植物病害防治方面未见报道。本实验通过研究桂枝提取物对17种常见植物病原菌的抑菌活性，为充分开发利用桂枝资源及植物病害田间防治实验提供一定的理论基础。

1 材料与方法

的测定 二倍稀释法稀释桂枝提取液，并制得提取液终浓度为0.195～100mg/mL含药培养基，平板涂布法将供试菌液均匀涂于培养基上，设置空白对照组（培养基不接种菌）、菌液对照组（培养基接种菌），将其置于28℃的培养箱中培养2d，以无菌生长的培养皿的含药浓度为其MIC，将无菌生长的培养皿继续培养7d后观察，以无菌生长的培养皿的含药浓度为其MFC[11]，每个处理重复3次。

1.2.2.4 桂枝提取物对其他15种植物病原菌抑菌活性的室内毒力测定 参考方法[12]，无菌条件下，将不同体积的桂枝提取液加入到融化的PDA中，制成终浓度分别为25、5、1、0.2mg/mL的含药培养基，以纯PDA培养基为对照，用直径6mm打孔器打取活化好的各供试菌菌落的边缘菌块，分别将其转接到各

不同浓度的含药PDA培养基及对照培养基中，每个处理重复3次，并将其置于28℃恒温培养箱中培养，7d后记录各菌落生长情况，并用十字交叉法测量菌落直径，计算抑制率：抑制率（%）=（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径×100。 1.3 数据分析

数据为平均值±标准差（±s），DPS 7.05软件绘制标准曲线，求得毒力回归方程、相关系数、EC50、置信区间。

2 结果与分析

2.1 桂枝提取物对柑橘青、绿霉菌的抑制活性

由表1可知，桂枝提取物对柑橘青、绿霉菌的菌丝生长表现出不同的抑制作用，对柑橘青、绿霉菌的抑菌圈大小（32.67±0.23）mm、（30.50±0.17）mm，此外，桂枝提取物在较低浓度对供试菌即表现出较好的抑制作用，对柑橘青、绿霉菌的MIC分别为3.125mg/mL和6.25mg/mL，MFC分别为6.25mg/mL和12.5mg/mL，因而柑橘青霉菌对桂枝提取物敏感性较优于绿霉菌。

2.2 桂枝提取物对其他15种植物病原菌的室内毒力测定

以桂枝提取液的浓度对数值为横坐标，平均抑制率的机率值为纵坐标，用DPS软件绘制标准曲线，求得桂枝提取液对15种供试植物病原菌的毒力回归方程，相关系数，EC50及其置信区间如表2所示。由表2可知，桂枝提取液对15种供试菌均有一定的抑菌活性，EC50能有效反映杀菌剂对病原菌抑制活性大小，EC50数值越小，说明杀菌剂对病原菌抑制活性越强。本实验中桂枝提取液对15种供试菌EC50值由小到大依次为：车前草穗枯病菌，猕猴挑拟茎点霉菌、