生豆粕的PS可达100%,但随热处理时间的延长,PS值降低,即使严重的过热处理,PS值也未接近零,试验表明,CP溶解度更加确切地反映了过熟处理的大豆粕,大豆饼与鸡的生产性能的关系,当PS>85%时,为过生,PS<70%时,则为过熟。 2、操作步骤
2.1称取1.5g大豆粕于250ml烧杯中,准确加入75ml的0.2%NaOH溶液在磁力搅拌器上搅拌20min。
2.2搅拌后,将50ml流体转移至离心管中,以2700r/min的转速离心10min。
2.3吸取上层清液15ml用凯氏烧瓶消化定氮,其量相当于0.3g的原样品。
2.4 豆粕的蛋白质溶解度计算 0.3g样品中的粗蛋白质含量 PS=──────────────×100 原样品的粗蛋白质含量 3、注意事项:
3.1 PS测定时粉碎粒度(全部过60目)及搅拌时间,搅拌速度影响较大。
3.2 由于PS测定不定因素较多,误差较大,作为豆粕生熟度判定参考不准,建议用PH值上升法测尿酶活性判断豆粕生熟程度。
方法二:脲酶活性(PH上升法)的测定方法
1、试剂
1.1 0.05M磷酸缓冲溶液:
取KH2PO4(J、I、S、K、9007特级)3.403g溶于100ml去离子水中,再取K2HPO4(J、I、S、K、9017特级)4.355g溶于100ml去离子水中,这两种溶液的混合液共配制1000ml调节PH至7.0显中性。该缓冲溶液有效期90天。 1.2尿素缓冲液:
取尿素(J、I、S、K、特级)15g溶于500ml磷酸缓冲液,为了防止霉菌发酵,加入5ml甲苯的防腐剂。该溶液PH值调至7.0。 2、操作方法
2.1将试样粉碎至0.35mm(42筛目)以下;
2.2分别准确称取0.4g(±0.001g)试样于两支试管中分别加入20ml磷酸缓冲液(空白)和20ml尿素缓冲溶液放入30℃恒温水浴中。 2.3每5分钟摇一次。
2.4待反应30min之后,在5min内测定PH值。 3、计算
尿素酶活化度=试样PH测定值-空白的PH值 其值不得超过0.3单位,最小值为0.02。 4、注意事项:
4.1尿素缓冲液放置时间过长要校正其PH值,否则PH值变化大。
4.2两缓冲液一定要一次配制后分出部分加尿素做为尿素缓冲
液。
方法三:大豆粕脲酶定性测定(红点法)
1、目的 在有指示剂苯酚红存在的条件下,豆饼中的尿素酶活性可按尿素转变为氨的方法定性测定。 2、设备和试剂
2.1稀硫酸(H2SO4)0.2N或更稀些,带滴管。 2.2尿素-酚红试剂:(本试剂的有效期仅约90天) 将1.2克酚红溶解于30毫升0.2N的NaOH中; 用蒸馏水稀释至约300毫升; 加入90克尿素并溶解之; 用蒸馏水稀释至2升;
加入14毫升1.0N的H2SO4(或70毫升0.2N的H2SO4); 用蒸馏水稀释至最后体积3升; 溶液应具明亮的琥珀色。 3、测定步骤
3.1在一个150毫升的烧杯中倒入少量试剂,注意溶液必须呈明亮的琥珀色。若溶液已转变为深桔红色,滴入稀硫酸溶液并搅拌之,直至溶液再度呈琥珀色。
3.2量一汤匙粉碎很好的豆饼粉,放置于陪替氏(petri)培养皿。 3.3在样品上加入两汤匙试剂,轻轻搅拌,将样品平铺于培养皿中。若仍有干豆饼斑点,则再加入试剂,直至将豆饼浸湿。 3.4放置5分钟后观察:
1.没有任何红点出现:再任其放置25分钟,若仍无红点出现,说明豆饼过熟。
2.有少数红点:少量尿素酶活性,豆饼可用。
3.放置25分钟,豆饼表面约有25%为红点复盖,少量尿素酶活性,豆饼可用。
4.放置25分钟;豆饼表面约有50%为红点复盖:尿酶活性强。 5.豆饼表面的75-100%为红点复盖:尿素酶活性很高,不应接受这种原料,因为豆饼过生。 油脂酸价的测定
1、适用范围 此法适用于不干性油、半干性油和干性油的测定。
2、原理:油脂中的游离脂肪酸与氢氧化钾产生中和反应,从氢氧化钾标准溶液消耗量,可计算出游离脂肪酸的量。 3、试剂
3.1 中性醇醚混合溶液或中性苯醇混合液,取化学纯95%乙醇和乙醚按2:1体积混合或苯和95%乙醇等体积混合,然后加入1%酚酞乙醇指示剂数滴,用0.1mol/L氢氧化钾溶液中和至微红色。
3.2 1%酚酞指示剂溶液。 3.3 0.1mol/L氢氧化钾标准溶液。 4、操作步骤
准确称取试样5.00-10.0g置于烧杯中,加入混合溶液50ml,振
摇溶解(必要时可温热),加入3-4滴1%酚酞乙醇指示剂,用0.1mol/L氢氧化钾标准溶液滴定至淡红色且在1min内不褪色为终点。 5、计算
CV×56.11 酸价(mgkoH/g)────── M
式中:C──氢氧化钾标准溶液的浓度,mol/L; V──消耗氢氧化钾标准溶液的体积,ml;
56.11──与1ml0.1mol/L氢氧化钾标准溶液相当的脂肪酸的质量mg。
M──样品的质量,g。 6、注意事项:
6.1用0.1mol/L的NaOH标准溶液代替0.1mol/1KOH标准溶液亦可,但计算公式不变。
6.2终点时看上层水溶液变红即可,下层较混蚀。 6.3临时配制醇醚试剂时可采用做空白的办法。 鱼粉酸价的测定方法 1、适用范围
此法适用于鱼粉、肉骨粉等动物蛋白酸价的测定。
2、原理:用醇醚混合溶液提取样品中的油脂游离脂肪酸,再与氢氧化钾产生中和反应,从氢氧化钾标准溶液消耗量,可计