PCR实验室SLAN-96P型核酸扩增荧光仪
操作维护程序
1．目的：使SLAN-96P型核酸扩增荧光检测仪能够正确和正常的使用，保证扩增及结果分析
的标准化、规范化。
2．适用范围：SLAN-96P型核酸扩增荧光检测仪。 3．负责人： 操作人： 4. 性能参数:见说明书。 5. 操作程序：
5．1 扩增反应前须先在SLAN-96P 8.2软件的设置面板上按照事先排好的标本位置进行设置。每次实验除了待检标本，还要包括一个阴性对照、一个阳性对照、一个阳性室内质控品、一组阳性标准品（4个梯度104、105、106、108）。
5．2 依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关，进入Windows XP界面。 5．3 接着打开光源检测器和PCR仪电源开关，预热5分钟。
5．4 样品放置：点击工具栏上的模块图标“A”、“B”、“AB”为仪器热盖解锁，然后将蓝色滑盖轻轻往后推到底，将样品放入样品孔内，关闭蓝色滑盖。
5．5 新建实验：点击“文件→新建→创建新实验”，进入下一步，编辑“实验名称及保存路径”，该保存路径为实验结果的保存路径，实验结束后可以通过该路径找到结果；进入下一步，对“热盖”、“温度控制”的参数进行设置（“热盖”推荐采用默认设置）；进入下一步，根据放置样品的位置选择模块A或/和模块B，点击确定。
5．6 实验条件设置：点击“项目→项目创建”，更改“项目名称”，勾选检测需要的通道，并输入目标名称。设置完毕，点击确定。界面如下：
5．7进入扩增参数设置界面：在窗口的上半部分设置热循环参数及荧光检测，窗口下半部分“扩增程序预览“中会以图表的方式同步显示所设置的参数，点击保存，然后再点击关闭。
5．8样品孔设置：选择好放置样品位置相应的孔，点击鼠标右键，点击“样品”，弹出“反应孔编辑”窗口，在“反应孔编辑”窗口中点击“浏览”按钮，弹出“选择项目”对话框，找到前面创建的项目文件，选中后在窗口右侧可以看到该项目中的相应参数设置，点击“确定”，返回到“反应孔编辑”窗口后，再次点击“确定”即可。
5．9此时软件界面如下：点击右侧边栏下部的“开始实验”，此时软件会弹出“是否确认要开始实验？”提示对话框，点击“确定”即可。
5．10运行结束后，根据扩增曲线分析结果，可以点击菜单栏上的“分析”，调整相关的阈值及基线。
5．11实验结束：用户在实验结束后，等到PCR管及模块温度冷却后，点击菜单栏上的A、B模块按钮，可以打开仪器的热盖，往后推动仪器的蓝色滑盖，取出PCR管。 5．11．1 整体曲线的观察,将所有曲线选中进行整体观察.
a)观察是否存在污染情况（包括标本污染和试剂污染），特别应注意大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。
b)观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。 5．11．2 阴性对照的分析
阴性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。 作用：用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。 5．11．3 阳性对照的分析
阳性对照：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。 作用：用以监测实验能否正常检出阳性标本，避免假阴性的出现。 5．11．4 阳性室内质控品的分析
阳性室内质控品：试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知或未知浓度的阳性室内质控血清。
作用：用以监控日常实验的精密度。 5．11．5 阳性标准品的分析
a)各梯度曲线的分布是否均匀，若各梯度曲线均未分开，则表明阳性标准品稀释可能存在问题，提示实验中存在较大人为误差。 b)观察各曲线的Ct值是否在平日的正常位置：
PCR实验室SLAN-96P型核酸扩增荧光仪操作维护程序
