发酵工程与设备实验
1. 决定摇瓶溶氧量的因素有哪些？它们如何影响摇瓶溶氧量？ 答：⑴摇瓶的透气性：8层纱布，纱布透气性越好，摇瓶溶氧量越大。⑵摇瓶的转速：转速越大，培养基流动越剧烈，增大与气体接触面积。⑶培养基的粘稠度：粘稠度越大，氧气越难进入，溶氧量越低。
2. 采用磷钼蓝法测定发酵液中的植酸酶活性实验中，空白对照中并未发生酶和底物的水解反应，但经过显示后，颜色却呈较深的蓝色，试解释其原因。
答：①磷钼蓝受热，易被氧化成蓝色还原物。②植酸钠中含杂质磷太多。
3. 红曲米发酵实验中，为何要添加酸水？无菌酸水如何制得？ 答：是为了洗脱菌种，同时为红曲霉生长创造酸性环境。 制备：取一烧杯的蒸馏水，往水中加入乳酸并调PH至4.0.然后取10ml配制好的溶液于干净的试管中，密封包扎后，放入高压灭菌锅灭菌，即可得到无菌酸水。
4. 产植酸酶黑曲霉的分离实验中，为何选用植酸钙而不选用植酸钠？
答：钠盐易溶解、钙盐难容，易形成透明圈，从而筛选。 5. 产植酸酶黑曲霉的分离实验中，为什么不将脱氧胆酸钠溶液
和氯霉素眼药水加入到筛选培养基中一起灭菌？
答：①脱氧胆酸钠会与铁盐高温时反应。②细菌性抗生素、自身就是杀菌的，且本身无菌，也不能灭菌。
6. 请详细说明产植酸酶黑曲霉的分离实验的实验原理。 答：以植酸钙为唯一磷来源的选择培养基，同时以透明圈法，从土壤中分离筛选产植酸酶的黑曲霉
7. 产植酸酶黑曲霉的摇瓶发酵实验中，摇瓶的作用有哪些？ 答：①气体和营养分布均匀②温度保持恒定③代谢产物分散④避免影响其他菌丝生长⑤防止细胞沉淀
8. 植酸酶酶活力测定实验中，若显色后的反应体系测定吸光度值为2.23，说明什么问题？该如何调整实验方案？ 答：浓度过大，该稀释。
9. 植酸酶活力测定时做标线的目的是什么？
答：标线是反应吸光度与无机磷浓度之间的关系，待我们测的样品吸光度后即可在标线上读出对应无机磷浓度，从而进行酶活计算。
10.简述灭菌锅的使用方法及步骤。
答：①向锅内注入水至三脚架上边缘、预热。
②放入物品，将直排气管并放入排气槽。 ③关盖，拧紧对应螺栓，打开开关加热 ④待压力达到0.05MPa，排冷空气，归零。
⑤使温度在121～126℃，20～30min，打开排气阀，自然归零，开盖，取出物品存用。 11.试述试管棉塞的详细制作步骤。
答：①剪方形纱布②取方形棉花③对折棉花④紧卷棉花⑤纱布包紧⑥塞入试管并整理⑦扎线⑧去残角 12.试述锥形瓶棉塞的详细制作步骤。
答：①取适量棉花②对折③紧卷④取适当大小方形纱布⑤包紧⑥塞入锥形瓶并整理⑦将纱布对角，残角塞入纱布内 13.试述发酵瓶棉塞的详细制作步骤。
答：取8层纱布（取一张对折三次）→塞在瓶口内→整理纱布，使纱布与瓶壁接触处无折痕即可
14.试述平板菌落接种试管斜面的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开平板和试管塞→用接种环在平板上取一环菌丝接种到斜面上，盖上平板，塞上试管塞 15.试述摇瓶种子接种发酵瓶的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开瓶塞→用移液管从种子瓶量取适量菌液接种到发酵瓶中→盖上瓶盖
16.试述红曲斜面孢子种接至三角瓶的详细步骤。
答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯，
再消毒手，在酒精灯附近打开无菌水试管塞和斜面试管塞→把无菌水加入斜面中，盖上塞子，震荡→在酒精灯旁打开药瓶塞和斜面塞→用移液管从斜面上吸取适量孢子液，注入摇瓶中→盖上塞子
17.植酸酶酶活力测定实验中，样品管与空白管的加样顺序有何不同？为什么不同？
答：TCA和植酸钠顺序相反。①保证加样相同 ②避免空白管中酶液与底物反应。
18.植酸酶酶活力测定实验中，Vc、植酸钠和TCA的作用各是什么？
答：Vc：强还原剂，显色液成分之一。植酸钠：酶反应的底物。TCA：酶失活剂
19.所培养的平板有没有可能得不到菌落？试分析得不到菌落的原因及措施。
答：有可能。①样品富集②取稀释倍数低的稀释液③人为原因引起的可重新培养平板
20.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，平板中为什么要加入1%脱氧胆酸钠溶液？
答：抑制真菌菌落菌丝生长速度，防止连成一片，有利得到单菌落。
21.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，氯霉素注射液或氯霉素眼药
水为何不需要灭菌，加入有何作用？
答：细菌性抗生素、自身就是杀菌的，且本身无菌，也不能灭菌。作用：抑制杂菌生长
22.产植酸酶黑曲霉的分离实验中，经过一次分离的菌种是否为纯种？若不纯，应采用那种分离方法最合适？
答：多半不是，进行多次纯化，不断进行分离，可采用划线培养。 23.简述黑曲霉纯种培养操作过程中的关键无菌操作技术。 答：①操作在酒精灯附近②灼烧接种环，靠壁冷却③管口对准酒精灯和接种环④灼烧试管口⑤动作要迅速 24.试举例说明摇瓶培养技术的应用。
答：摇瓶培养Cc168鸡腿菌，周期短，产量高，成本低，污染少。
25.红曲米固态发酵中，为什么每天要将三角瓶摇动2～3次？ 答：①充分混匀菌体，充分发酵②温度，不致局部过热影响发酵③放出底部CO?，使O?充分接触
26.酸奶制做实验中，如何判断主发酵是否完成？
答：通过乳酸菌发酵牛奶的乳糖产生乳酸，乳酸使牛奶中的酪蛋白（占乳蛋白85%）变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。同时，可形成酸奶特有的香味和风味。 27.酸奶制作的基本原理是什么？ 答：①凝固②PH检测
发酵工程与设备实验试题答案
