沙门氏菌属(3种)诊断血清学试验
注册证编号:国械注准 20163401706
目的
制定沙门氏菌属诊断血清使用程序,指导对沙门氏菌属进行血清学分型。
原理
用沙门氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清,经吸收出去非特异性凝集素后制成,通过凝集试验原理供沙门氏菌属常见菌型定型。
试剂及实验设备
1,沙门氏菌属诊断血清:天津生物芯片技术有限责任公司生产的规格为13种的沙门氏菌属诊断血清 2,试剂保存:2~8°C避光保存,防止冻结,在有效期内使用。
实验步骤
1,产品在使用前最好恢复温度到室温。
2,由患者粪便或其他材料分离的革兰氏阴性杆菌,经初步生化检查,疑似沙门氏菌时,应先分别用各种多价血清做玻片凝集试验,阳性反应时,再与相应的单价血清做玻片凝集试验,作出诊断。在洁净玻片上用接种环滴加两滴彼此分离的生理盐水。
3,从营养琼脂平板上挑取分纯的菌落,分别与玻片上的生理盐水混匀。
4,用接种环滴加1~2滴血清(10-15ul)于玻片上一个菌落与生理盐水的混合液中,另一个菌落与生理盐水的
5,混合液中加入一滴生理盐水作为对照。 6,用接种环分别混匀玻片上的两种混合液。
7,轻轻摇动玻片1分钟,观察。于1分钟内呈2+及以上凝集现象为阳性,1分钟内呈现2+以下凝集现象为阴性。
8,凝集结果判断标准如下:
注意事项
1. 2. 3. 4. 5. 6.
反应强度 4+ 3+ 2+ 1+ - 判别依据 反应澄清透明,凝集颗粒较多、较大 反应澄清透明,凝集颗粒较多、较小 反应有些混浊,但仍可见较多颗粒状凝集 反应非常混浊,只有少许颗粒状凝集 反应完全混浊,未出现任何凝集 本产品只能作为沙门氏菌O抗原血清型判定的辅助方法,最终的判定需形态学、生化方法和血清学方法共同进行。
本产品应避免冷冻。反复冻融会使血清产生沉淀。
本产品在保存过程中可能会产生浑浊或沉淀,这并不表示该产品已被污染。离心或者过膜去掉浑浊或沉淀后,可以正常使用。
本产品含有0.3%叠氮化钠作为防腐剂,丢弃时需倒入下水管,并用大量的水冲洗下水管。 若待检菌株与本产品均无明显凝集现象,应将可疑菌落经2YT固体斜面培养基培养12-16小时,用1ml生理盐水洗下培养物,于121℃高压15分钟或水浴煮沸30分钟,再进行血清凝集反应。 若对照呈现明显凝集现象,说明所检菌株为粗糙型,应重新选取其他菌落进行凝集反应。
有效期24个月。 参考文献
1. 《中国生物制品检定规程》
2. Ewing.W.H. Edwards & Ewing’s Identification of Enterobacteriaceae.
3. Carpenter K.P. (1968) Association of Clinical Pathologists Broadsheet 60.
生产企业 天津生物芯片技术有限责任公司
沙门氏菌诊断血清说明书
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