澳洲坚果SSR-PCR反应体系优化及其应用

澳洲坚果SSR-PCR反应体系优化及其应用

唐莹莹1，杨祥燕1，蔡元保1*，李穆1，曾黎明1，郑文武1，邱文武2，李季东1，叶维雁1

【摘 要】以澳洲坚果DNA为模板，通过单因素设计方法对影响SSR-PCR反应体系的5个主要因素进行了优化。结果表明，澳洲坚果SSR-PCR反应体系的最适条件为：20 μL的反应体系中，包含30 mg·L-1模板DNA，1.0 U Taq聚合酶，2.5 mmol·L-1 Mg2+，0.6 μmol·L-1引物和0.3 mmol·L-1dNTPs。采用该反应体系对不同引物和15份澳洲坚果种质进行验证，扩增条带的可靠性和稳定性良好，且分辨率较高。因此，该SSR-PCR反应体系可用于澳洲坚果种质源鉴定及遗传多样性分析研究。 【期刊名称】福建农业学报 【年(卷),期】2018(033)002 【总页数】5

【关键词】澳洲坚果；SSR-PCR；体系优化；单因素设计

澳洲坚果Macadamia spp.是山龙眼科Proteaceae澳洲坚果属Macadamia常绿乔木，原产于澳大利亚昆士兰与新南威尔的亚热带雨林，是中国南方发展起来的新兴果树，在云南、广西、广东、贵州、福建等地均有种植。澳洲坚果营养价值和经济价值高，风味独特，享有“干果皇后”的美誉。目前，有关澳洲坚果种质资源的研究主要集中在形态学特征描述和遗传多样性分析[1]，在分子水平上通过同工酶技术[2,3]和分子标记技术，如RAPD[4]、AFLP[5]、ISSR[6]和SCoT[7]等初步对澳洲坚果进行种质鉴定和遗传多样性研究，但对其种质资源的遗传背景缺乏深入研究。