Gli—1 Smo和Cripto—1在肺癌组织中的表达和相关性研究
目的 探讨Gli-1，Smo和Cripto-1在肺癌中表达及其相关性。方法 采用免疫组化方法测定40例肺癌标本及癌旁组织中Gli-1，Smo和Cripto-1三种蛋白的表达并分析Gli-1，Smo和Cripto-1的关系。结果 免疫组化结果显示：Gli-1，Smo和Cripto-1在肺癌组织中高表达，在癌旁组织中不表达或者低表达，（P＜0.05）三者在肺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（P＜0.05）。而且肺癌组织中Cripto-1的表达与Gli-1和Smo的表达成正相关（P＜0.05）。结论 Sonic hedgehog信号通路异常激活和Cripto-1高表达在肺癌的发生发展中起着重要作用，二者可能共同参与了肺癌的发生。
标签：Gli-1；Smo；Cripto-1；肺癌
肺癌是常见的恶性肿瘤之一，肺癌一经发现就处于疾病的中晚期，丧失了手术机会，由于化疗耐药，肺癌目前有效率尚不足40%[1]。近期研究表明Gli-1和Smo在肺癌的发生发展中起着重要作用[2-3]，Cripto-1作为表皮生长因子的成员之一，也参与了多种肿瘤的发生发展甚至侵袭转移[4-5]。本文采用免疫组化的方法检测肺癌组织及癌旁组织中Gli-1，Smo和Cripto-1，探讨三种蛋白在肺癌的表达及Gli-1，Smo和Cripto-1的关系。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集大连市第五人民医院2008～2014年手术切除并经病理证实肺癌为手术石蜡包埋标本40例，其中男性28例，女性12例；平均年龄（56.3±5.4）岁；同时癌旁组织作为对照组。
1.2方法
1.2.1材料 Gli-1，Smo和Cripto-1单抗购自美国Epitomics公司；SP免疫组化试剂盒、磷酸盐缓冲液、中性树胶、DAB显色试剂盒、苏木素染液购、枸橼酸钠抗原修复液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.2.2免疫组化检测肺癌组织及癌旁组织中Gli-1，Smo和Cripto-1蛋白的表达所有标本经10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，0.01 mol/L枸橼酸钠缓冲液抗原热修复，内源性过氧化物酶37℃封闭20 min；加一抗，4℃孵育过夜；加二抗37℃孵育30 min；加入辣根过氧化物酶（HRP）37℃孵育20 min；DAB显色，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光学显微镜下检测并拍照[2]。
1.3统计学处理 所有实验均重复3次以上，采用SPSS16.0软件处理，计量资料采用χ2检验，Cripto-1与Gli-1，Smo蛋白表達的相关性采用Spearman相关分析，以P＜0.05表示有显著性差异。
2 结果
2.1 Cripto-1，Gli-1，Smo免疫组化检测结果 Cripto-1，Gli-1，Smo免疫组化检测结果在肺癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达或者不表达。Cripto-1在肺癌组织中的阳性表达率为75%，明显高于已癌旁组织（12.5%），两者比较有显著性差异（P＜0.05）；Gli-1在肺癌组织中的阳性表达率为65%，而癌旁组织的阳性表达率仅为10%，两组间比较有显著差异（P＜0.05）；Smo在肺癌组织和癌旁组织中阳性表达率分别为70%，22%，二者比较有统计学差异（P＜0.05）。
2.2 Cripto-1与Gli-1，Smo蛋白表达的相关性 Spearman相关分析显示术前化疗肺癌组织中Cripto-1的表达与Gli-1表达呈正相关（r=0.663，P＜0.05），其表达与Smo表达亦呈正相关（r=0.655，P＜0.05），见表1。
3 讨论
Sonic hedgehog信号通路是人类胚胎发育过程中的重要信号通路，Gli-1和Smo作为该通路的关键因子参与了多种肿瘤的发生发展，包括乳腺癌，胰腺癌，食道癌，大肠癌等[6-8]。本研究结果显示：Gli-1和Smo在癌旁组织不表达或者弱表达，其在肺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（P＜0.05）。
诸多研究发现Cripto-1在结肠癌、乳腺癌、胃癌和胰腺癌等多种恶性肿瘤组织中高表达，而在正常组织中不表达或者低表达[9]。我们研究表明Cripto-1在癌旁组织不表达或者弱表达，其在肺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（P＜0.05）。提示Cripto-1也在肺癌的发生发展中起着重要作用。
此外我们的研究表明肺癌组织中Cripto-1的表达与Gli-1和Smo表达成正相关（P＜0.05）。提示Sonic hedgehog信号通路和Cripto-1密切相关。
综上，Sonic hedgehog信号通路异常激活和Cripto-1高表达在肺癌的发生发展中起着重要作用，二者可能共同参与了肺癌的发生，二者内在关系有待于进一步研究。
参考文献：
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[3]姚洪莹黄美欧刘涛程谟朝.Smo在肺癌患者的癌组织中的表达及临床意义[J].中国民康医学，2015，27（10）：70-71.
[4]Watanabe K，Meyer MJ，Strizzi L，et al.Cripto-1 is a cell surface marker for
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Gli—1 Smo和Cripto—1在肺癌组织中的表达和相关性研究
