尿路上皮癌抗原1过表达对胰腺癌CaPan-2细胞侵袭和转移能力的影响

尿路上皮癌抗原1过表达对胰腺癌CaPan-2细胞侵袭和转

移能力的影响

许朝 陈思 吕超蓝 余跃 张开光 【期刊名称】中华胰腺病杂志 【年(卷),期】2017(017)004 【总页数】3 ·短篇论著·

长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)是指一类长度大于200个核苷酸、不编码蛋白质的RNA。近年来研究发现，它在诸如表观遗传调控、转录激活、转录干扰和核内转运等多种生物学过程中发挥重要的调控作用[1]。尿路上皮癌抗原1(urothelial carcinoma associated 1，UCA1)即是一个lncRNA，在人类多种恶性肿瘤中异常表达，并显著增强癌细胞的增殖和耐药性[2-4]。本课题组前期研究发现，UCA1在胰腺癌组织中高表达，且与临床转移成正相关，抑制UCA1可抑制人胰腺癌PANC1细胞的体外侵袭能力[5]。本研究通过脾内注射切脾法建立胰腺癌肝转移模型，进一步探讨UCA1过表达对胰腺癌细胞体内转移能力的影响。

一、材料与方法

1．稳定过表达UCA1的CaPan-2细胞株的建立：全长UCA1基因(1.44 kb)由上海吉玛制药技术有限公司合成。合成的UCA1基因片段及pGLV5-EF1a-EGFP/Puro质粒用NotⅠ和NsiⅠ双酶切后经1%琼脂糖凝胶电泳分离，回收和纯化酶切片段，用T4 DNA连接酶将UCA1片段以黏端方式与质粒片段连接，转化感受态DH5a大肠杆菌扩增后提取重组质粒，通过酶切及测序鉴定正确后，