学的基础研究;值得注意的是基因工程技术若使用不当、管理不善,也会给人类带来灾难。 7.试比较转录与复制的区别。
提示:①目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA;②方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板,复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为模板,在DNA的两条链上进行;③复制需要引物,转录不需要引物;④复制过程存在校正机制,转录过程则没有;⑤转录产物需要加工,复制产物不需要加工;⑥复制与转录都经历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板,新链按碱基互补原则,5'→3’方向合成。 8. 试列表比较常染色质DNA与端粒DNA的复制。 酶 模板 时间 生物学功能 常染色质DNA复制 DNA 聚合酶等一些复制必须酶 常染色质DNA 最先 确保遗传信息传代 端粒DNA复制 端粒酶(逆转录酶) RNA 最后 完成线性染色体末端复制,防止遗传信息的丢失
9. 将大肠杆菌从37度转移到42度时,其基因表达如何变化?
其基因表达的变化为:细胞基因特异性表达是细胞适应环境变化的重要方式,且转录水平的调控是重要一环。在转录水平调控中,一种方式就是不同σ因子的表达和大量使用。
E.coli从37度到42度,σ因子表达发生变化,细胞大量表达σ32,而σ32与σ70识别启动子序列不同,因而RNA pol选择转录的基因发生变化,主要是大约17种蛋白被称为热激蛋白。 10.简述原核生物转录作用的过程。 结合(binding) : σ与RNA pol结合,大大降低了后者与DNA链的非特异性结合,而到了正确的promoter处,其亲和力提高了100倍;
解旋(unwinding): RNA pol将使约17bp的DNA解螺旋,形成一个open complex ; 起始(initiation): RNA pol合成8-10个nt ,σ因子被释放; 延长(elongation): 形成一个转录泡,开始延长;
终止(termination): (1) 不依赖于ρ蛋白的terminator形成一个大发夹,在新合成 RNA中其后有一段寡聚U,导致转录终止,RNA pol被释放;(2)依赖于ρ蛋白的terminator也形成一个发夹,但由于没有长段U,所以需要ρ蛋白帮助,终止RNA合成。 11.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主要区别。
原核生物:操纵子 RNA聚合酶 核心酶加σ因子 不需加工与翻译相偶联 类核 真核生物:单基因 RNA聚合酶Ⅱ 聚合酶加转录因子 需加工故与翻译相分离 核内
(三)填空题
1.Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验中,区别不同DNA用__同位素示踪_____方法。分离不同DNA用__超速离心_____方法,测定DNA含量用___紫外分光光度____方法,
2.DNA聚合酶I(E.coli)的生物功能有_聚合作用______、__5’→3’外切酶作用_____和___3’→5’外切酶____作用。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I,可将其分为大、小两个片段,其中__大_____片段叫Klenow片段,具有__5’→3’聚合酶作用_____和___3’→5’外切酶____作用,另外一个片段具有__5’→3’外切酶 _____活性。
3.在E.coli中,使DNA链延长的主要聚合酶是_DNA聚合酶Ⅲ______,它由___7____亚基组成。DNA聚合酶Ⅱ主要负责DNA的___修复____作用。
4.真核生物DNA聚合酶有__DNA聚合酶α_____,___DNA聚合酶β____,___DNA聚合酶γ____,__DNA聚合酶δ_____。其中在DNA复制中起主要作用的是___DNA聚合酶α____和___DNA聚合酶σ____。
5.解旋酶的作用是___使DNA双螺旋打开____,反应需要ATP_提供能量,结合在后随链模板上的解旋酶,移动方向__ 5’→3’____,结合在前导链的rep蛋白,移动方向___ 3’→5’____。 6.在DNA复制过程中,改变DNA螺旋程度的酶叫___拓扑异构酶____。
7.SSB的中文名称___单链DNA结合蛋白____,功能特点是___使单链保持伸长状态____。
8.DNA连接酶只能催化__双_____链DNA中的缺口形成3’,5’- 磷酸二酯键,不能催化两条 游离的单链
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间形成3’,5’- 磷酸二酯键,真核生物DNA连接酶以___ ATP ____作为能源,大肠杆菌则以 NAD+ 作为能源,DNA连接酶在DNA_复制_____、___修复_____、___重组____中起作用。
9.DNA生物合成的起始,需要一段___ RNA ____为引物,引物由__引物_____酶催化完成,该酶需与—些特殊___蛋白质____结合形成___引物体____复合物才有活性。
10.DNA生物合成的方向是__ 5’→3’_____,冈奇片段合成方向是__ 5’→3’_____。 11.由逆转录酶所催化的核酸合成是以__ RNA _____为模板,以__三磷酸脱氧核苷酸(dNTP) _____为底物,产物是__与RNA互补的DNA链_____。
12.DNA突变主要分为__点突变_____和__结构畸变_____两大类。
13.诱变剂大致分为__物理诱变剂_____、_化学诱变剂______、__生物诱变剂_____三种类型。
14.RNA生物合成中,RNA聚合酶的活性需要__ DNA _____模板,原料是__ ATP _____、__ GTP _____、__ UTP _____、___ CTP ____。
15.大肠杆菌RNA聚合酶为多亚基酶,亚基组成__α2ββ’δ___,称为__全__酶,其中_α2ββ’__亚基组成称为核心酶,功能__合成RNA链__;σ亚基的功能__σ保证RNA聚合酶对启动子的特异识别__。 16.用于RNA生物合成的DNA模板链称为___反意义链____或____负链___。
17.RNA聚合酶沿DNA模板__ 3’→5’_____方向移动,RNA合成方向___ 5’→3’____。
18.真核生物RNA聚合酶共三种___ RNA聚合酶I ___、___ RNA聚合酶Ⅱ___、__ RNA聚合酶Ⅲ____,它们分别催化__ rRNA _____、__ mRNA _____和 ___ tRNA 5SrRNA ____的生物合成。 19.某DNA双螺旋中,单链5’… ATCGCTCGA … 3’为有意义链,若转录mRNA,其中碱其排列顺序为5’… __ AUCGCUCGA _____… 3’。
20;能形成DNA--RNA杂交分子的生物合成过程有__转录_____、___逆转录____。形成的分子基础是__碱基互补配对_____。
21.DNA复制中,___前导__链的合成是___连续__的,合成的方向和复制叉移动方向相同;_后随_链的合成是___不连续____的,合成的方向与复制叉方向相反。 22.一条单链DNA(+)的碱基组成A2l%、G29%,复制后,RNA聚合酶催化转录的产物的碱基组成是__ A21%、G29%、U21%、C29%_____。
23.RNA聚合酶中能识别DNA模板上特定起始信号序列的亚基是__因子__ ,该序列部位称__启动子部位_。 24.在细菌细胞中,独立于染色体之外的遗传因子叫__质粒_____。它是一种___环____状双链 DNA,在基因工程中,它做为___基因载体____。
25.hnRNA加工过程中,在mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列叫__外显子_____。不在mR—NA上出现,不代表蛋白质的DNA序列叫__内含子_____。
(四)选择题
1.DNA以半保留方式复制,如果一个具有放射性标记的双链DNA分子,在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射性情况如何( ① )。 ①其中一半没有放射性 ②都有放射性 ③半数分子的两条链都有放射性 ④都不含放射性
2.关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项都是正确的( ② )。 ①只有存在DNA时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。 ②在合成过程中,RNA聚合酶需要一个引物。 ③RNA链的延长方向是5’→ 3’。
④在多数情况下,只有一条DNA链作为模板。
3.下列关于DNA和RNA聚合酶的论述哪一种是正确的( ④ ): ①RNA聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多核苷酸链
②RNA聚合酶需要引物,并在生长的多核苷酸链的5’端加上核苷酸 ③DNA聚合酶能在核苷酸链的两端加上核苷酸
④所有RNA和DNA聚合酶只能在生长的多核苷酸链的3’端加上核苷酸。
4.修补胸腺嘧啶有数种方法,其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行,试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用( ③ ):
①DNA连接酶→DNA聚合酶→核酸内切酶 ②DNA聚合酶→核酸内切酶→DNA连接酶 ③核酸内切酶→DNA聚合酶→DNA连接酶
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④核酸内切酶→DNA连接酶→DNA聚合酶
5.DNA聚合酶在分类时属于六大酶类中的哪一种( ① )。 ①合成酶类 ②转移酶类 ③裂解酶类 ④氧化还原酶类
6.催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶Ⅱ对α--鹅膏蕈碱( ③ )。
①不敏感 ②敏感 ③高度敏感 ④低度敏感 7.DNA复制中RNA引物的主要作用是( ① )。
①引导合成冈奇片段 ②作为合成冈奇片段的模板
③为DNA合成原料dNTP提供附着点 ④激活DNA聚合酶 8.下列关于单链结合蛋白的描述哪个是错误的( ④ )。
①与单链DNA结合防止碱基重新配对 ②保护复制中单链DNA不被核酸酶降解 ③与单链DNA结合,降低双链DNA Tm值 ④以上都不对 9.紫外线对DNA的损伤主要是( ② )。
①引起碱基置换 ②形成嘧啶二聚体 ③导致碱基缺失 ④发生碱基插入 l0.有关转录的错误描述是( ③ )。
①只有在DNA存在时,RNA聚合酶方可催化RNA ②需要NTP做原料 ③RNA链的延伸方向是3’→ 5’ ④RNA的碱基需要与DNA互补 11.关于逆转录作用的错误叙述是( ③ )。
①以RNA为模板合成DNA ②需要一个具有3’-OH末端的引物
③以5’→ 3’方向合成,也能3’→ 5’方向合成 ④以dNTP为底物 12.体内参与甲基化反应的直接甲基供体是( ② )。
①Met ②S—腺苷甲硫氨酸 ③甲酰甲硫氨酸 ④Met-tRNA
13.关于大肠杆菌DNA聚合酶I的下列论述哪些是正确的( ①②③ )。 ①它是一个金属酶 ②它能从3’-OH端逐步水解单股DNA链
③它在双螺旋区有5’→ 3’核酸酶活性 ④它需要DNA模板上的游离5’-OH 14.试将下列DNA复制的有关步骤按正确的顺序排列( ②→①→③→⑤→④ )。 ①DNA指导的RNA聚合酶合成RNA引物 ②解旋蛋白打开DNA双链 ③DNA指导的DNA聚合酶合成的DNA互补链
④DNA连接酶连接DNA片段 ⑤核酸内切酶切除RNA引物
15.下列关于核不均一RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的( ①③⑤ )。 ①它们的寿命比大多数细胞液的RNA为短
②在3’端有一个多聚腺苷酸(polyA)长尾,是由DNA编码的 ③它们存在于细胞核的核仁外周部分 ④链内核苷酸不发生甲基化反应
⑤有大约四分之三成份将被切除棹,以形成mRNA
16.DNA复制的精确性远高于RNA的合成,这是因为( ②④ )。 ①新合成的DNA链与模板链形成了双螺旋结构,而RNA链不能 ②DNA聚合酶有3'→ 5'外切酶活力,而RNA聚合酶无相应活力
③脱氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的配对 ④DNA聚合酶有5’→ 3’外切酶活力,RNA聚合酶无此活性 17.有关逆转录酶的论述哪些是正确的( ①②④ )。 ①具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性 ②具有依赖于DNA的DNA聚合酶活性
③不具备5’→ 3’或3’→ 5’核酸外切酶活性 ④催化合成反应时,需要模板及3’-OH引物 18.下列哪几种突变最可能是致命的( ③④ )。
①腺嘌呤取代胞嘧啶 ②胞嘧啶取代尿嘧啶 ③缺失三个核苷酸 ④插入二个核苷酸 19.Crick于1958年提出的中心法则包括( ①③⑤ )。
①DNA复制 ②RNA复制 ③转录 ④逆转录 ⑤翻译 20.DNA生物合成中需要以下哪些酶参与( ①②③④⑤ )。
①引物酶 ②解旋酶 ③解链酶 ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶
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21.RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成( ①③④ )。 ①α ②σ ③β ④β’ ⑤δ
22.RNA生物合成的终止需要以下哪些成分( ①② )。
①终止子 ②ρ 因子 ③ δ 因子 ④dnaβ蛋白 ⑤ α亚基 23.RNA与DNA生物合成相同的是( ②④⑤ )。
①需RNA引物 ②以3’→ 5’方向DNA为模板 ③两条模板链同时合成 ④新链生成方向5’→3’ ⑤形成3’,5’- 磷酸二酯键 24.DNA的切除修复需要以下哪几种酶参与( ②③④ )
①光裂合酶 ②核酸内切酶 ③DNA聚合酶I ④DNA连接酶 ⑤RNA聚合酶 25.目的基因的制备方法有( ③④⑤ )
①DNA复制 ②RNA转录 ③mRNA逆转录 ④化学合成法 ⑤限制性内切酶切取 26.真核细胞mRNA的加工修饰包括以下内容( ①②④⑤ )。
①切除内含子,连接外显子 ②5’端接上“帽子” ③3’端接上CCA ④3’端添加多聚(A)尾 ⑤碱基甲基化
27. 指导合成蛋白质的结构基因大多数是( ① )
①单考贝顺序 ②中度重复顺序 ③高度重复顺序 ④回文顺序 ⑤以上都正确 28.下面哪些因素可防止DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级结构? ( ⑤ ) ①DNA的修复作用 ②密码的简并性 ③校正tRNA的作用 ④核糖体对mRNA的校正 ⑤以上都正确 29.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是( ④ )
①碱基替换 ②磷酸酯键断裂 ③碱基丢失 ④形成共价连接的嘧啶二聚体 ⑤碱基插入 30. 能编码多肽链的最小DNA单位是( ⑤ )
①顺反子 ②操纵子 ③启动子 ④复制子 ⑤转录子
(五)是非题
1.大肠杆菌DNA生物合成中,DNA聚合酶I主要起聚合作用。( × ) 2.原核生物DNA的合成是单点起始,真核生物为多点起始。( √ ) 3.DNA生物合成不需要核糖核苷酸。( × )
4.以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时,子代链合成方向5’→ 3’,以另一条亲代DNA链 5’→ 3’)为模板时,子代链合成方向3’→ 5’。( × )
5.在DNA生物合成中,半保留复制与半不连续复制指相同概念。( × ) 6.在DNA合成终止阶段由DNA聚合酶Ⅱ切除引物。( × ) 7.目前发现的逆转录酶大部分来自于病毒粒子。( √ ) 8.依赖DNA的RNA聚合酶由紧密结合的α2ββ’σ亚基组成,其中σ因子具有识别起始部位和催化RNA合成的功能。( × )
9.RNA的生物合成不需要引物。( √ )
10.大肠杆菌的mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工。( √ )
11.DNA聚合酶I切除引物RNA属3’→ 5’外切酶作用,切除错配的核苷酸属5’→ 3’外切酶作用。( × )
12.冈崎片段的合成需要RNA引物。( √ )
线形DAN复制后,先导链引物切除后,无法延伸,故DNA链的一股链缩短 13.转录时,RNA聚合酶的核心酶沿模板DNA向其5’端移动。( √ ) 14.RNA不能做为遗传物质。( √ )
15.以单链DNA为遗传载体的病毒,DNA合成时一般要经过双链的中间阶段。( √ )
16.亚硝酸做为一种有效诱变剂,是因为它直接作用于DNA,使碱基中的氨基氧化生成羰 (酮)基,造成碱基配对错误。( √ )
17.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ只起聚合作用,不能校对错配碱基。( × ) 18.RNA也能以自身为模板合成一条互补的RNA链。( √ )
19.真核生物的各种RNA都必须经过剪切、修饰才能成熟。( √ )
20.真核基因外显子是指保留在成熟RNA中的相对应的序列,不管它是否被翻译。( × )
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