第39卷第1期
CHINESE
中华中
OF
医药学刊
MEDICINE
Vol．39No．1Jan．2021
2021年1月AＲCHIVESTＲADITIONALCHINESE
DOI：10．13193/j．issn．1673-7717．2021．01．046
五倍子发酵炮制百药煎主要药理作用比较研究
陈祎甜，张振凌，王瑞生，林秀敏，张江山，闫梦真
（河南中医药大学，河南郑州450008）
摘要：目的研究比较五倍子发酵为百药煎后其抗炎镇痛、止咳化痰等药理作用的变化。方法采用二甲苯致耳廓肿
胀法评价抗炎作用，采用热板法和醋酸扭体法评价镇痛作用，采用浓氨水致咳法和酚红模拟化痰药效结合分光光度法分别评价止咳化痰作用，分别对比五倍子发酵为百药煎后其药理作用变化；通过测定二甲苯致耳廓肿胀模型血清中肿瘤坏
白介素10（IL－10）、白介素6（IL－6）和白介素1β（IL－1β）含量，探究其抗炎机制。结果百药煎死因子α（TNF－α）、
能显著抑制热板和醋酸引起的疼痛反应（P＜0.05），作用强于五倍子（P＜0.05）；显著抑制二甲苯致耳肿胀现象（P＜
0.05），IL－6和IL－1β含量（P＜0.05）；显著降低咳嗽潜伏期时间，降低血清中TNF－α、减少咳嗽次数（P＜0.05），而五倍子差异无统计学意义（P＞0.05）；酚红排出量明显高于五倍子组（P＜0.05）。结论五倍子发酵为百药煎后抗炎镇
IL－6和IL－1β的释放有关。痛、止咳化痰作用增强，其抗炎机制可能与抑制炎症因子TNF－α、
关键词：五倍子；百药煎；发酵；抗炎镇痛；止咳化痰
中图分类号：Ｒ283
文献标志码：A
7717（2021）01-0187-06文章编号：1673-
ComparativeStudyonMainPharmacologicalEffectsofBaiyaoDecoction（百药煎）
ProcessedbyWubeizi（GallaChinensis）Fermentation
CHENYitian，ZHANGZhenling，WANGＲuisheng，LINXiumin，ZHANGJiangshan，YANMengzhen
（HenanUniversityofChineseMedicine，Zhenzhou450008，Henan，China）
Abstract：ObjectiveTostudythechangesofpharmacologicaleffectsofWubeizi（GallaChinensis）oneffectsofanti－inflam-mation，analgesia，relievingcoughandreducingphlegmafterbeingfermentedintoBaiyaoDecoction（百药煎）．MethodsAnti－
inflammatoryeffectwasevaluatedbyxyleneinducedauricleswellingmethodandtheanalgesiceffectwasevaluatedbyhotplatemethodandaceticacidwrithingmethod．Therelievingcoughandreducingphlegmeffectswereevaluatedbyconcentratedammo-niainducedcoughmethodandphenolredsimulatedexpectoranteffectcombinedwithspectrophotometry，andpharmacologicaleffectchangesofWubeizi（GallaChinensis）fermentedintoBaiyaoDecoctionwerecomparedrespectively．Bymeasuringthecon-tentsoftumornecrosisfactor（TNF－α），interleukin－10（IL－10），interleukin－6（IL－6）andinterleukin－1β（IL－1β）inserumofxylene－inducedauricleswellingmodel，theanti－inflammatorymechanismwasexplored．ＲesultsBaiyaoDecoctionwhichwasstrongerthanWubeizi（Gallacansignificantlyinhibitthepainreactioncausedbyhotplateandaceticacid（P＜0.05），
Chinensis）（P＜0.05）．Itcansignificantlyinhibitearswellingcausedbyxylene（P＜0.05），andreducethecontentsofTNF－α，IL－6andIL－1βinserum（P＜0.05）．Theincubationperiodofcoughwassignificantlyreducedandthecoughfrequency
wasreduced（P＜0.05），butWubeizi（GallaChinensis）hadnosignificantdifference（P＞0.05）．Phenolredexcretionwassig-analgesiaandnificantlyhigherthanWubeizi（GallaChinensis）group（P＜0.05）．ConclusionTheeffectsofanti－inflammatory，
relievingcoughandreducingphlegmofWubeizi（GallaChinensis）fermentedintoBaiyaoDecoctionareenhanced．Theanti－in-flammatorymechanismmayberelatedtoinhibitingthereleaseofinflammatoryfactors．
Keywords：Wubeizi（GallaChinensis）；BaiyaoDecoction（百药煎）；fermentation；anti－inflammatoryandanalgesiceffect；
relievingcoughandreducingphlegm
现代研究表明，五倍子具有解热、镇痛、抗炎、抗菌、抗病
［1－11］
毒、抗氧化、抗衰老、降血糖等多种药理作用，茶叶具有降血糖、降血压、抗血栓、降血脂、抗动脉粥样硬化、抑菌、提高免
［12］
抗肿瘤及抗艾滋病毒等药理作用。百药煎是由五倍疫力、
［13－14］
，子同酒糟或酒曲及茶叶经发酵制成的块状物味酸、甘，
性平，具有清热化痰，生津止渴的功效，用于肺热咳嗽，风火牙［15］痛，口舌糜烂，久痢脱肛。查阅文献，关于百药煎的研究多
炮制工艺以及化学成分等，暂未针对百药煎药理为历史沿革、
基金项目：国家重点研发计划（2018YFC1707200）；国家中医药行业专
项（201507004－03）
作者简介：陈祎甜（1996－），女，河南洛阳人，硕士研究生，研究方向：
中药饮片质量及炮制作用机制。
通讯作者：张振凌（1957－），女，河南商丘人，教授，博士研究生导师，
mail：zhangzl研究方向：中药饮片质量及炮制作用机制。E-6758@163．com。
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医
值
药
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作用的研究，而对五倍子发酵为百药煎后其药理作用是否发生
变化的研究也较少。本实验采用二甲苯致耳廓肿胀法、醋酸扭测定血体法和热板法比较百药煎与五倍子的抗炎和镇痛作用，清中肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白介素10（IL－10）、白介素6（IL－6）和白介素1β（IL－1β）的含量，探究其抗炎机制，以期
从而为五倍子发酵为百药明确发酵炮制对五倍子药效的影响，煎后药理作用的变化提供依据。
咳嗽咳痰为常见的临床肺部疾病症状，古今医家对其发病
。《内经》机制都有较深的研究认为其病因不外乎内、外两途，外因多由六淫侵袭肺脏，致肺失宣降发病；内因多为脏腑功能
失调，累及于肺脏，致使发病。现代医学认为，由于气管受外界刺激引起支气管黏膜充血水肿，分泌物积聚于支气管腔，而引
［16］
发咳嗽咳痰。本实验采用小鼠浓氨水致咳法和酚红模拟化痰法考察五倍子发酵百药煎对小鼠止咳化痰功效变化的影响，为进一步研究五倍子发酵百药煎止咳化痰作用机理提供理论依据。1
材料与试剂
1．1仪器KQ－500DV型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；BS210S万分之一电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；FW－100高速万能粉碎机（北京中兴伟业仪器有限公司）；8002型温控水浴锅（北京永光明医疗仪器厂）；SZ－93自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；恒温恒湿箱（上海一恒科学仪器有限公司）。
1．2试剂阿司匹林（西安利君制药有限责任公司，批号：H61021710）；生理盐水（河南科伦药业有限公司，批号：C118041701－2）；二甲苯（天津市富宇精细化工有限公司，批号：20150627）；冰醋酸（津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20160301）；氨水（烟台市双双化工有限公司，批号：20160601）；咳特灵（广州白云山医药集团股份有限公司，批号：4180072）；180725LB）；盐酸氨溴索口服液（江苏恒瑞医药股份有限公司，
IL－10、IL－6和IL－1β酶联免疫分析试剂盒小鼠TNF－α、
（上海酶联生物科技有限公司，批号：06/2018）。
1．3药物五倍子（批号：160429）购自安徽石田中药饮片有限公司，经河南中医药大学陈随清教授鉴定为漆树科植物盐肤木Ｒ．chinensisMill．等树上寄生倍蚜科昆虫角倍蚜后形成的虫《中华人民共和国药典》瘿，符合2015年版五倍子项下的各项
规定；百药煎（批号：20180307）为实验室自制，系参照文献发
［17］
）“百酵炮制，经检测符合浙江省中药炮制规范（2015年版
项下的各项规定，没食子酸质量分数41．94%。药煎”
，选取80只痛阈值为5～30s的小鼠。随机分成8组：空
0．2g/kg）、白对照组（生理盐水）、阳性对照组（阿司匹林，0．9、1．8g/kg）和百药煎低、五倍子低、中、高剂量组（0．45、
1．35、2．7g/kg），中、高剂量组（0．675、给药量为0．2mL/
10g，120min分别测定痛阈连续灌胃5d，末次给药后60、
［18－19］
。值2．3
［20－21］醋酸致小鼠扭体实验选取80只小鼠，雌雄各半，“2．2”按照项下动物分组，给药量为0．2mL/10g，连续灌胃5
d，末次给药1h后，腹腔注射0．7%醋酸溶液（10mL/kg），记录小鼠扭体的次数并计算抑制率。抑制率=［空白对照组扭体均数－给药组扭体均数）/空白对照组扭体均数］×100%。2．4二甲苯耳肿胀实验［22－23］选取90只小鼠，雌雄各半，随0．2机分成9组：空白对照组、模型组、阳性对照组（阿司匹林，g/kg）、0．9、1．8g/kg）和百药煎五倍子低、中、高剂量组（0．45、1．35、2．7g/kg），中、高剂量组（0．675、给药量为0．2mL/10低、g，连续灌胃5d，末次给药1h后，除空白对照组外，其余8组小鼠于每只小鼠右耳两面涂抹二甲苯0．1mL致肿胀，左耳不涂为正常耳。3．5h后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，于同一部位用打孔器冲下耳片，直径8mm，于分析天平上称重。以两耳片质量差为耳肿胀度，计算小鼠耳肿胀度及抑制（模型组－给药组）/模型组］×100%。抑制率=［率，
2．5抗炎机制研究［24－26］按照“2．4”项下设置分组及给药，0．5h末次给药1h后，小鼠右耳两面涂抹二甲苯0．1mL致肿，
10000r/min离心10min，后摘眼球取血，静置2h，取上清，测IL－10、IL－6和IL－1β的含量。定血清中TNF－α、
2．6浓氨水致咳实验选取小鼠40只，随机分为4组：空白
0．23g/kg）、对照组（生理盐水）、阳性对照组（咳特灵，五倍子1次/d，组（1．8g/kg）、百药煎组（2．7g/kg），连续给药3d，记以小鼠腹部收缩以录小鼠咳嗽潜伏时间和2min内咳嗽次数，
及张嘴记录为1次咳嗽，比较各组咳嗽潜伏时间以及咳嗽次
［27］数。2．7
化痰实验取小鼠40只，分为4组：空白对照组（生理盐
0．03g/kg）、阳性对照组（盐酸氨溴索口服液，五倍子组水），
（1．8g/kg）、1次/d，百药煎组（2．7g/kg），连续3d，末次给药前，禁食不禁水12h，末次给药30min后，腹腔注射0．5%新配
1h后断颈处死，制的苯酚红溶液，沿甲状软骨剪下一段气管，放入离心管，加入3mL生理盐水和1mol/L的NaoH溶液0．2
mL，3000r/min离心2min，取上清液，紫外可见分光光度计546nm波长处测量并记录吸光值，以吸光值代表苯酚红排出
［28］量，比较各组吸光值。
2．8统计学方法采用SPSSStatistics19．0软件对数据进行
珋±s表示。测定结果用x显著性分析，
1．4
SPF级昆明种小鼠，雌雄兼用，体质量18～22g，
由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供，许可证号SCXK（鲁）
动物实验方法
20140007。22．1
药液制备分别取五倍子和百药煎适量，加入10倍量水，浸泡30min后煎煮，保持微沸30mim，过滤；煎煮3次，合0．9、1．8g/kg的浓缩至适量，分别稀释得浓度为0．45、并滤液，
1．35、2．7g/kg百药煎水煎液。五倍子水煎液，浓度为0．675、取阿司匹林适量，用蒸馏水溶解配制成浓度为0．2g/kg的药
液。2．2
热板实验将雌性小鼠投入已调节温度为（55±0．5）℃的热板仪，以小鼠自投入热板至舔后足的时间作为该鼠痛阈
33．1
实验结果
热板实验结果与空白对照组相比，给药60min后阳性
对照组（阿司匹林），五倍子中、高剂量组和百药煎各剂量组均阳性对照能明显提高小鼠痛阈值（P＜0.05）；给药120min后，组（阿司匹林），五倍子和百药煎各剂量组均能极显著提高小鼠痛阈值（P＜0.01），说明五倍子和百药煎的镇痛作用与剂量呈正相关；百药煎高剂量组给药120min后痛阈值明显高于五倍子高剂量组（P＜0.05），其余各剂量组有升高趋势但差异无统计学意义（P＞0.05），表明五倍子发酵为百药煎后镇痛作用
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增强。结果见表1、图1。
珋±s）表1五倍子和百药煎对热板所致疼痛的影响（x
组别空白对照组阳性对照组（阿司匹林）五倍子低剂量组五倍子中剂量组五倍子高剂量组百药煎低剂量组百药煎中剂量组百药煎高剂量组0.05。n1010101010101010剂量/（g/kg）－0．200．450．901．800．6751．352．70给药前不同时间痛阈值/（s）60min*
醋酸扭体实验结果与空白对照组比较，阳性对照组
（阿司匹林）能明显减少小鼠扭体次数，降低疼痛反应（P＜
0.01）；百药煎各剂量组均能显著抑制醋酸引起的疼痛反应，减
120min16．63±2．2016．96±2．0615．03±3．2121．38±4．2614．79±4．1319．27±4．8817．49±3．0127．93±3．43＊＊23．46±3．72＊＊
少小鼠扭体次数，差异具有统计学意义（P＜0.05），且镇痛作用于剂量成正相关；五倍子仅高剂量组与空白对照组相比，差低剂量和中剂量组差异无统计异具有统计学意义（P＜0.05），
学意义（P＞0.05）；与五倍子组相比，百药煎中剂量和高剂量组镇痛效果明显增强，差异有统计学意义（P＜0.05），表明五倍子发酵为百药煎后镇痛作用增强。结果见表2、图2。3．3耳肿胀实验结果与模型组比较，五倍子和百药煎高、中、低3个剂量组均对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有显著的抑
“红、制作用（P＜0.05）。表明五倍子和百药煎均能有效抑制炎症肿、热、痛”的症状，具有一定的抗炎作用。结果见表3、图3。
16．12±2．3623．16±3．31*29．06±5．04＊＊
17．03±3．1624．14±4．40*30．29±4．95＊＊15．78±3．5820．97±4．25*28．44±5．03＊＊17．32±2．3823．83±3．43*30．33±3．73＊＊18．56±2．9924．74±5．05*34．95±5．23＊＊a
P＜0.05，P＜0.01；a与五倍子组比较，P＜注：*与空白组比较，＊＊与空白组比较，P＜0.05，P＜0.01；a与五倍子组比较，P＜0.05。注：*与空白对照组比较，＊＊与空白对照组比较，
图1
五倍子和百药煎对热板所致疼痛的影响
抑制率/（%）
－83．593．1322．66
*
表2
珋±s）五倍子和百药煎对醋酸致小鼠扭体的影响（x
组别
n1010101010101010
剂量/（g/kg）
－0．200．450．901．800．6751．352．70
扭体次数25．60±3．034．20±1．99＊＊24．80±4．0222．80±4．1018．40±3．1320．27±1．12*18．52±2．35*15．90±3．73*
aa
TNF－α、IL－6和IL－1β的含量明显升高（P＜0.05），而IL－10含量则无明显变化（P＞0.05）；与模型组相比，阳性对照组（阿司匹林）、五倍子高剂量组与百药煎高剂量组中TNF－α、IL－6和IL－1含量明显降低（P＜0.05），IL－10含量则无明IL－6和IL－显变化（P＞0.05）；且百药煎各剂量组TNF－α、1β含量较五倍子各剂量组更低，表明五倍子发酵百药煎后抗炎镇痛作用增强，并且与剂量呈正相关，其抗炎机制可能与抑
IL－6和IL－1β的释放有关。结果制体内炎症因子TNF－α、
见表4、图4。
x±s）表3五倍子与百药煎对各组小鼠二甲苯耳廓肿胀的影响（珋
组别
模型组
阳性对照组（阿司匹林）五倍子低剂量组五倍子中剂量组
五倍子高剂量组百药煎低剂量组百药煎中剂量组百药煎高剂量组
n1010101010101010
剂量/（g/kg）－0．200．450．901．800．6751．352．70
肿胀度/（mg）85．44±8．6546．38±6．08＊＊51．30±7．23
＊＊
空白对照组
阳性对照组（阿司匹林）五倍子低剂量组五倍子中剂量组五倍子高剂量组百药煎低剂量组百药煎中剂量组百药煎高剂量组
28．1317．8927．0935．85
P＜0.01，*与空白对照组比较，P＜注：＊＊与空白对照组比较，0.05；a与五倍子组比较，P＜0.05。
抑制率/（%）
－45．7239．9640．3142．4639．9641．1343．69
51．00±7．12＊＊49．17±3．8751．30±4．99＊＊50．30±5．06＊＊48．11±4．94＊＊
＊＊
P＜0.01。注：＊＊与模型组比较，
3．5
致咳实验结果结果与空白对照组比较，阳性对照组
（咳特灵）与百药煎组能显著增加咳嗽潜伏期时间，降低咳嗽咳嗽次数未显次数（P＜0.05）；而五倍子组咳嗽潜伏期时间，著降低（P＞0.05）。表明与五倍子相比，百药煎止咳作用明显
P＜0.01，*与空白对照组注：＊＊与空白对照组比较，P＜0.05；a与五倍子组比较，P＜0.05。比较，
图2
五倍子和百药煎对醋酸致小鼠扭体的影响
增强。结果见表5、图5。
3．6化痰实验结果与空白对照组比较，阳性对照组（盐酸氨溴索口服液）、五倍子组和百药煎组酚红排出量显著增加（P＜0.05），百药煎组排出量明显高于五倍子组（P＜0.05），表
3．4血清中炎症因子测定结果与空白对照组相比，模型组
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P＜0.01。注：＊＊与模型组比较，
图3
五倍子与百药煎对二甲苯耳廓肿胀的影响
表4
组别
空白对照组
模型组
阳性对照组（阿司匹林）
五倍子低剂量组五倍子中剂量组五倍子高剂量组百药煎低剂量组百药煎中剂量组百药煎高剂量组
n101010101010101010
珋IL－10、IL－6和IL－1β含量的影响（x±s）五倍子与百药煎对TNF－α、
剂量/（g/kg）
－－0．200．450．901．800．6751．352．70
TNF－α/（ng/L）72．19±2．5887．45±2．83b67．43±4．18
81．47±2．7876．56±4．0979．00±6．5373．30±3．67
*
IL－6/（ng/L）14．08±0．3419．19±0．87b13．55±2．2712．44±1．1612．98±0．7710．95±1．27
*
IL－1β/（ng/L）13．32±0．4618．39±0．69b12．93±0．6713．60±0．5113．36±1．1911．85±2．16
*
IL－10/（ng/L）45．28±4．5245．49±4．0046．45±8．8251．90±6．5348．77±3．7947．26±1．4250．86±5．2551．62±5．0148．99±2．01
14．81±5．34*
*
*
15．46±5．45*
*
74．60±3．05*
*
11．55±1．50＊＊
*
13．28±0．74＊＊
*
77．01±5．21*
*
12．02±1．20*
＊＊
13．40±2．20*
＊＊
P＜0.01；*与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01。注：b与空白对照组比较，＊＊与模型组比较，
P＜0.01；*与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01。注：b与空白对照组比较，＊＊与模型组比较，
图4
IL－10、IL－6和IL－1β含量的影响五倍子与百药煎对TNF－α、
表5
组别空白对照组珋±s）五倍子与百药煎止咳实验结果（x
n10101010剂量/（g/kg）－0．231．82．7潜伏期/（s）66．38±2．94110．22±12．7655．00±3．9772．00±3．18*
*
4讨论
2min内咳嗽次数65．88±6．3255．11±4．1364．43±5．54*
炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。炎症又分为急性炎症和慢性炎症，本实验采用的外源性化学物质（二甲苯）引发
二甲苯作为化学致炎剂，可引发某些炎症介质，如的急性炎症，
组胺、激肽和纤维蛋白溶解酶的释放，引起局部毛细血管通透
造成耳部急性渗出性炎性水肿，性的增加及炎症细胞的浸润，
IL－1β、IL－6是炎症此法操作简便易行，耗药量少。TNF－α、
对加剧炎症反应起着重要作用。反应中重要的前炎症因子，
TNF－α是其中的代表因子，作用于血管内皮细胞，可诱导一IL－6分泌，氧化氮合酶（INOS）表达，增加IL－1β、同时增加
使炎症不断发展，进而引起全趋化因子和细胞黏附分子表达，
a
［29］
身炎症反应。IL－1β主要由激活的单核细胞、巨噬细胞产生，可发挥与TNF－α相似的作用，作用于血管内皮，促进趋化
阳性对照组（咳特灵）五倍子组百药煎组35．13±4．28*
P＜0.05。注：*与空白对照组比较，表6
珋±s）五倍子与百药煎化痰实验结果（x
组别
n10101010
剂量/（g/kg）
－0．031．82．7
酚红排出量（吸光度）0．0530±0．0220．0863±0．031*0．0830±0．021*0．1375±0．035*
空白对照组
阳性对照组（盐酸氨溴索口服液）五倍子组百药煎组
P＜0.05；a与五倍子组比较，P＜0.05。注：*与空白对照组比较，
明五倍子发酵为百药煎后化痰作用明显增强。结果见表6、图6。
刺激单核巨噬细胞及中性粒细胞释放更多的细胞因子的分泌，
［30］
TNF－α、IL－1β是介炎症介质，对炎症反应起放大作用。
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P＜0．05。注：*与空白组比较，图5
五倍子与百药煎止咳实验结果
五倍子具有敛肺降火、涩肠止泻、敛汗止血、收湿敛疮功效，临床上用于治疗肺虚久咳、肺热痰嗽、久泻久痢、盗汗、消便血、外伤出血、痈肿疮毒、皮肤湿烂；百药煎具有清热渴、化痰、生津止渴功效，用于治疗久咳痰多、咽痛、便血、久痢脱
［15］肛、口疮、牙疳、痈肿疮疡。结合本次实验结果，在治疗肺热痰嗽、久咳痰多、消渴、咽痛、口疮、牙疳等症状时，百药煎的治
［35］
疗效果强于五倍子；而在外伤出血、痈肿疮毒、皮肤湿烂、久痢
五倍子的疗效较好。脱肛等方面，
综上所述，五倍子发酵为百药煎后抗炎镇痛和止咳化痰的
作用功效明显增强，其抗炎镇痛作用的增强与发酵后没食子酸等成分含量的升高和新成分表没食子儿茶素的生成紧密相关，
IL－6和IL－抗炎机制可能与抑制机体内炎症因子TNF－α、1β的释放有关。参考文献
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P＜0.05；a与五倍子组比较，P＜0.05。注：*与空白组比较，
图6
五倍子与百药煎化痰实验结果
［31］
“炎性风暴”导炎症反应的关键炎性细胞因子，其通过的级联放大效应形成一个复杂的网络，介导炎症反应
。当单核细
IL－1β等刺激后，胞、血管内皮细胞等受到TNF－α、会产生并
释放IL－6，其可延缓巨噬细胞对中性粒细胞的吞噬，使得炎症部位中性粒细胞聚集增多，加剧炎症反应
［32］
。从实验结果
得出，五倍子发酵为百药煎后可以降低炎症小鼠血清中TNF－IL－6和IL－1β含量，α、表明百药煎抗炎镇痛的作用可能是IL－6和IL－1β的释放而发通过抑制体内炎症因子TNF－α、
实验结果为五倍子发酵百药煎抗炎镇痛药效的变化及挥作用，
作用机制提供了依据，为后续药理药效学的研究奠定了基础。在本课题同期研究中，从百药煎中分离出了没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯等5种单体，并且筛选出抗炎有效部位为水洗脱及10%乙醇洗脱部位，没食子酸、没食子酸甲表没食子儿茶素是其抗炎作用的主要活性物质；而五倍子酯、
发酵为百药煎后，没食子酸含量由2%～4%升高至35%以上，并且有新成分表没食子儿茶素等生成
［33］
，这与实验中五倍子
发酵为百药煎后抗炎镇痛作用增强的结果相互证明，表明其抗炎镇痛作用的增强与发酵后没食子酸等成分含量的升高和新成分表没食子儿茶素的生成紧密相关。
本实验前期预实验发现五倍子与百药煎低剂量和中剂量组止咳化痰作用较弱，因此在正式实验时仅设置了高剂量组。五倍子与百药煎均具有明显的止咳化痰作用，并且与五倍子相比，发酵后百药煎的止咳化痰作用增强。五倍子中富含鞣质，容易与蛋白质结合形成大分子沉淀物，对胃肠道具有刺激作用；而发酵后形成的大量赖氨酸能够有效避免鞣质与蛋白质的结合，从而缓解服用后食欲减退的不良反应，提高其收敛效［34］果，增强止咳化痰作用，具体作用原理还需进一步实验加以证明。
191
第39卷第1期
CHINESE
中华中
OF
医药学刊
MEDICINE
Vol．39No．1Jan．2021
2021年1月AＲCHIVESTＲADITIONALCHINESE
DOI：10．13193/j．issn．1673-7717．2021．01．047
从祛瘀化痰法探讨平喘方及拆方
对哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的干预机制
1，22，31，21，214
徐万超，虞坚尔，薛征，张新光，刘亚尊，明溪
（1．上海中医药大学附属市中医医院，上海200071；2．上海中医药大学，上海201203；
3．上海市中医药研究院中医儿科研究所，上海200071；4．云南中医药大学第一附属医院，云南昆明650021）“化痰”“祛瘀”摘要：目的研究平喘方及拆方干预哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的作用机制，并探究与两种治法干预
哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组、气道炎症的疗效。方法对60只BALB/c雄性小鼠按随机数字表分为空白对照组、
拆方1（祛瘀方）组、拆方2（化痰方）组共6组，每组10只，运用卵蛋白（OVA）和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激
发，建立小鼠支气管哮喘模型，末次激发后给药7d并杀检取材，运用HE染色观察各组小鼠气道及肺组织病理改变，酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中白介素4（IL－4）、干扰素γ（INF－γ）、白介素17（IL－17）、白介
T盒子转录因素10（IL－10）表达，蛋白质印迹法法（WesternBlot）检测肺组织中转录因子GATA结合蛋白3（GATA－3）、
子（T－bet）蛋白表达。结果与空白组比较，模型组病理染色显示炎症细胞侵润明显，管壁及肺组织结构受到破坏，周围IL－4、IL－17、GATA－3表达增高（P＜0.05），INF－γ、IL－10、T－bet表达减低（P＜0.05）。与组织伴有炎性物质渗出，
IL－17、GATA－3表达（P＜0.05），平喘方及拆方组可显著减少病理染色中的气道炎症程度，减低IL－4、升模型组对比，
IL－10、T－bet表达（P＜0.05），IL－17、GATA－3高INF－γ、拆方组间比较祛瘀方在改善气道病理优于化痰方，在降低IL－4、IL－17、GATA－3表达，因子水平具有优于化痰方的统计学趋势。结论：平喘方及拆方可减少哮喘小鼠IL－4、升高INF－IL－10、T－bet表达，γ、改善Th1/Th2免疫失衡，祛瘀与化痰两种治法相比较，祛瘀法在改善气道炎症方面疗效较优。
关键词：哮喘；平喘方；Th1/Th2失衡；治法
中图分类号：Ｒ285．5
文献标志码：A
7717（2021）01-0192-07文章编号：1673-
ZY3－CCCX－1－1010，ZY（2018－2020）－基金项目：国家自然科学基金面上项目（81874488）；上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划［
CCCX－1012］
作者简介：徐万超（1991－），男，山东潍坊人，博士研究生，研究方向：小儿肺系疾病。
mail：1066@szy．sh．cn。通讯作者：虞坚尔（1952－），男，上海人，教授、主任医师，博士研究生导师，硕士，研究方向：小儿肺、脾、肾系疾病，流派。E-［14］张培利，郭慧娴，张国丽．炮制对中药四气五味及归经的药性影
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五倍子发酵炮制百药煎主要药理作用比较研究 - 陈祎甜 - 图文
