江西***药业股份有限公司GMP文件
原料检验操作规程
题目：路路通原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20861-00 制定人： 制定日期：2020年 月 日 版本：2 页数：1/4 审核人： 审核日期：2020年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期：2020年 月 日 生效日期：2020年 月 日 目的：规范路路通原药材检验操作 范围：路路通原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2020年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量：本品为聚花果，由多数小蒴果集合而成，呈球形，直径2～3cm。基部有总果梗。表面灰棕色或棕褐色， 有多数尖刺和喙状小钝刺，长0.5～1mm，常折断，小蒴果顶部开裂，呈蜂 窝状小孔。体轻，质硬，不易破开。气微，味淡。 3 3.1 【鉴别】 3.1.1 （1）显微鉴别 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛等。 3.1.2 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：本品粉末棕褐 色。纤维多碎断，直径13～45μm，末端稍钝或钝圆，壁多波状弯曲，木化， 胞腔宽或窄，内常含棕黄色物。果皮石细胞类方形、棱形、不规则形或分 枝状，直径53～398μm，壁极厚，孔沟分枝状。表皮细胞断面观长方形， 长34～55μm；表面观多角形，直径6～17μm，壁厚，具孔沟，内含棕黄 色物。单细胞非腺毛，常弯曲，长42～126μm，基部宽11～19μm，含棕 黄色物。 3.2 （2）薄层鉴别 仪器与试剂：分析天平、硅胶G薄层板、层析缸、乙酸乙酯、中性氧化3.2.1 铝柱、甲醇、甲苯、甲酸、硫酸、乙醇等。 方法：取本品粉末2g，加乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤3.2.2 液置水浴上浓缩至约2ml，加于中性氧化铝柱（200～300目，2g，内径为 10mm）上，用乙酸乙酯25ml洗脱，弃去洗脱液，再以50%甲醇25ml洗脱， 收集洗脱液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取 路路通酸对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同 一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20:2:1）5～10℃ 放置12小时的上层溶液为展开剂，展开缸预平衡15分钟，展开，取出， 晾干，喷以1%香草醛的10%硫酸乙醇溶液，80℃加热至斑点显色清晰。供 试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑。 【检查】 4 4.1 水分 不得过9.0％（通则0832第二法）。 仪器：电热鼓风干燥箱、分析天平、粉碎机、药筛等。 4.1．1 方法：取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过4.1.2 5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100－105℃干燥5
第 1 页 共 4 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
4.1.3 4.2 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.3 4.3.1 4.3.2 4.3.3 4.4 4.4.1 4.4.2
小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中的含水量（%）。 计算公式： W样+W0－W1 水分% = ×100% W样 式中： W0 称量瓶的重量（g）。 W1称量瓶与样品的重量（g）。 W样样品的重量（g）。 总灰分 不得过5.0％（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 酸不溶性灰分 不得过2.5%（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取上述灰分，加入稀盐酸10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过， 坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止，滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。 计算公式： W1－W0 酸不溶性灰分% = × 100% W 式中: W0----------- 坩埚的重量（g）。 W1----------- 酸不溶性灰分与坩埚的重量（g） W样---------- 样品的重量（g）。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得过150mg/kg 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L)等。 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过 ---------------------------- --------------------------- --------------------------- 样第 2 页 共 4 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
4.4.3 5 5.1 5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5
1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： 6 （V供-V空）×C×0.032×10 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g。 【含量测定】 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 仪器与试剂：高效液相色谱仪、数显恒温水浴锅等。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（87:13:0.1）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按路路通酸峰计算应不低于6000。 对照品溶液的制备 取路路通酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇20ml，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加无水乙醇溶解，转移至2ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、8μl，供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。 本品按干燥品计算，含路路通酸（C30H46O3）不得少于0.15%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 第 3 页 共 4 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
m ------------------------- 样品的重量（g）。 f ------------------------- 稀释体积。 第 4 页 共 4 页
GC-YL-20860路路通原料检验操作规程
