微生物实验
微生物实验
细菌形态观察 细菌分布 消毒灭菌
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细菌形态观察
一、实验目的
1. 2. 3. 4. 5.
掌握光学显微镜(油镜)的使用及日常维护 掌握细菌的三种形态
掌握临床常见细菌的形态及染色 掌握细菌的特殊结构
了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点
二、实验原理
1. 普通光学显微镜(油镜)的使用
1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头
2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰 3. 根据需要调节显微镜亮度 2. 普通光学显微镜的维护
1. 移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前
2. 油镜用毕后, 要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最
后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头
3. 镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内 4. 做好使用记录 3. 微生物知识
1. 细菌按形态分类:
球菌:球形(包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等) 杆菌:杆状(包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等) 螺旋菌:螺旋状(包括螺旋菌、弧菌等) 2. 细菌的基本结构
细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体 3. 细菌的特殊结构 荚膜:如肺炎双球菌
鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。如:变形杆菌为周毛菌 菌毛
芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌
4. 微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体 真核类:真菌、原生动物、显微藻类 非细胞类:病毒、亚病毒 5. 真菌
单细胞:圆形、芽生孢子。如:酵母菌
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多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。如:霉菌 6. 白假私酵母菌(白念)
生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落
厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定
致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、 内脏感染、CNS感染
微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝 7. 新型隐球菌
生物学性状 :圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)
致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢
性脑膜炎
微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体
外围有宽厚荚膜为阳性
三、实验材料
记号笔:1支;大镊子:1支;火柴: 1盒;蜡笔:1支;试管架: 1个;酒精灯:1个;接种环: 1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个
四、实验内容
1. 观察细菌三种形态 1)球菌
链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌 2)杆菌
破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌 3)螺形菌
弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌 2. 观察细菌的特殊结构
芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌 3. 绘图
葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)
五、实验结果
绘8幅细菌镜下图,已交。
六、思考与讨论
1. 显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因
(1) 未滴加镜油 (2) 镜头不干净
(3) 标本放置反了,所以达不到对焦平面 (4) 制片问题:标本太厚、染色误差等