6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建
刘莉;吴谨;侯一平;张霁;戴浩霖;廖淼;张林;陈国弟;李英碧
【期刊名称】《中国法医学杂志》 【年(卷),期】2006(021)005
【摘要】目的 为在310基因分析仪上进行6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件.方法 以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500～80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的Matrix标准物,用4种Matrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的Matrix文件.结果 扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰.混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系.结论 建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析Matrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础. 【总页数】5页(274-277,彩插Ⅱ)
【关键词】法医物证学;荧光分析;内标;矩阵值
【作者】刘莉;吴谨;侯一平;张霁;戴浩霖;廖淼;张林;陈国弟;李英碧
【作者单位】四川大学华西基础医学与法医学院,四川,成都,610041;四川大学华西基础医学与法医学院,四川,成都,610041;四川大学华西基础医学与法医学院,四川,成都,610041;四川大学华西基础医学与法医学院,四川,成都,610041;四川
6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析体系的构建
