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本科学生综合性实验报告
学号
学院 专业、班级
实验课程名称 枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖
化酶的活性测定
教师及职称 开课学期 2013 至 2014学年 下 学期
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云南师范大学教务处编印
一． 实验设计方案
枯草芽孢杆菌的液体发酵及其产实验序号 实验三 实验名称 物中糖化酶的活性测定 实验时间 （一）实验目的 1. 掌握机械搅拌通风发酵罐的基本结构 (1) 发酵罐主体 (2) 蒸汽灭菌系统：正确把握各阀门的操作 (3) 通气系统 (4) 加热冷却循环系统：各管道联络关系 (5) 搅拌动力系统 (6) 智能控制系统 2. 掌握发酵罐小试的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，参数2013.4.7-2013.4.14 实验室 130 - 考试资料
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设定 3. 掌握发酵过程中的参数测定和在线控制，包括：pH，DO，温度，搅拌速度，生物量，产物生成量，消泡，CO2。 4. 运用所学发酵工程基本理论分析发酵过程中的实验数据，讨论根霉的发酵规律。 （二）实验原理及实验流程或装置示意图 1、实验原理 液体发酵的概念 液体发酵技术是现代生物技术之一，它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。工业化发酵生产必需采用发酵罐，而实验室中发酵培养多采用三角瓶。得到的发酵液中含有菌体、被菌体分解及未分解的营养成分、菌体产生的代谢产物。发酵液直接供作药用或供分离提取，也可以作液体菌种。 枯草芽孢杆菌简介 1.1生理特性 枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7～0.8×2～3微米，- 考试资料
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着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖。 1.2作用机理 1、枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用； 2、枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长； 3、刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力； 4、枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用； 5、能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。 1.3应用范围 枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应该比较广泛,在污水处理及生物肥发酵- 考试资料
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或发酵床制作中应用也相当广泛,是一种多功能的微生物. 1、 市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理。 2、 畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖。 3、可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用；（如：JT菌种） MBS菌株：在畜禽养殖中使用益生菌不仅可避免长期使用抗生素所引起的肠道微生态平衡被破坏、 产生耐药性及药物残留等问题 ,还能提高动物的生产性能和免疫力。枯草芽孢杆菌能改善肠道微生态环境 ,促进动物生长和提高抗病力 ,而且分泌各种消化酶类 (如蛋白酶、 淀粉酶、 脂肪酶和纤维素酶等 ) ,促进养分的消化、 吸收 ,更重要的是枯草芽孢杆菌在不利环境条件下能形成芽孢 ,在饲料制粒、 贮存及胃酸环境中仍能保持较高活性。因此 ,枯草芽孢杆菌比其他有益微生物有着更多的优点而得到广泛的研究和应用。 实验流程： - 考试资料
草芽孢杆菌的液体发酵及其产物中糖化酶的实验
