（生物科技行业）CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI临床微生物实验室标准解读
CLSI2010更新
CLSI临床微生物实验室标准解读第三辑
2010年CLSI药敏试验的更新 中国医学科学院北京协和医学院杨启文王辉
美国临床和实验室标准化研究所(TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)是壹个国际性、跨学科、非营利的、致力于发展操作标准的教育组织。其抗菌药物敏感性试验小组委员会
(SubcommitteeonAntimicrobialSusceptibilitytesting)每年组织该领域专家和药厂代表等对药敏相关文件M100进行壹次修订。目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文件作为药敏指导文件进行试验操作和报告，本文将CLSIM100-S20(2010年)的主要更新点总结如下： 壹、主要格式的更新：
下表显示了壹些在M100-S19(2009年)中位于最后的附录在M100-S20(2010年)文件中新的命名、编号和位置。 表1.M100-S20的格式更新 M100-S19中的名称 附录A(ESBLs的筛选和确证试验) 附录G(碳氰酶烯酶的筛选和确证试验) 附录B(金黄色葡萄球菌的筛选试验) M100-S20名称/位置 补充性表格2A-S1/表2A的最后 补充性表格2A-S2/表2A的最后 补充性表格2C-S3/表2C的最后 附录C(凝固酶阴性葡萄球菌的筛选试验) 补充性表格2C-S4/表2C的最后 附录D(肠球菌的筛选试验) 附录E(药敏结果的确证建议) 附录F(药敏试验的质控菌株) 二、表1和表2介绍内容中的更新 (1)修订了“非敏感”的定义：M100-S20中对“非敏感”的定义是由于耐药菌株缺失或稀少因而仅确立了敏感性解释标准。当药物对菌株的MIC高于或抑菌圈直径低于此折点时需报告为非敏感。非敏感且不意味着菌株携带某种耐药机制。有可能MIC高于敏感折点的菌株缺乏耐药机制且且属于野生菌株，只不过其出现于敏感性折点确立后。对于“非敏感”的菌株，菌株鉴定和药敏结果需被再次确认。
(2)对“使用头孢噻吩的折点仅用于预测对其他头孢菌素的敏感性”增加注释：在M100-S20中，头孢噻吩的折点仅可用于预测菌株对口服药物，包括孢羟氨苄，头孢泊肟，头孢氨苄和氯碳头孢的敏感性。旧的数据认为头孢噻吩的结果能够预测某些其他头孢菌素的敏感性可能仍然正确，但目前的数据尚不能支持此论点。
(3)在M100-S20的第26页增加第VII部分来描述筛选试验且总结他们的局限性以及对应的确证试验。该部分总结了
肠杆菌科菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌和肺炎链球菌的耐药表型初筛试验和对应的确证试 验。
(4)在表1和1A的警告框内，M100-S20将头霉素类药物加入脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物列表中。 在M100-S19中，口服抗菌药物、第壹代和第二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、克林霉素、大环内酯类、四环素类和氟喹诺酮类被列为脑脊液分离菌株中不能常规报告的抗菌药物，因为这些药物不是脑脊髓感染的选择药物，在M100-S20中，头霉素类药物(如头孢西丁、头孢美唑和头孢替坦)也被纳入此类药物。 三、肠杆菌科菌相关的更新
(1)修订了头孢唑啉、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑肟、头孢曲松和氨曲南的折点，且在折点后增加了对应 的用药方案。
补充性表格2D-S5/表2D的最后 附录A/M100-S20的最后，术语表前 附录B/M100-S20的最后，术语表前 Ⅰ修订折点的原因
在CLSI文件M100-S20的第17页有壹个关于折点如何建立的简短注释。本段话参考的是CLSI关于折点发展的指南
性文件：M23－《体外药敏试验标准和质量控制参数的发展》。简单地说，修改折点涉及微生物学、药理学和临床数据的系统性回顾。公认的专家，制药业赞助商和监管机构参和这壹过程，其中包括CLSI药敏试验小组委员会每年俩次的在公开会议讨论。若为新的药物建立原始折点，对照的临床试验数据是必需的。然而在修改折点时，虽然对照临床试验是可取的，但在处理快速变化的细菌耐药机制和“老”的药物时这些试验往往且不可行。因此，小组委员会必须依赖于由发表的文献资料、专家意见和共识所支持的最佳实践。流行病学、临床实践以及任何折点修订的监管影响必须予以考虑。
折点需要修订是由于不断变化的耐药机制和细菌菌群分布，不断进步的科学增进了人们对临床反应药理学因素 的认识以及“最佳治疗”被临床医生所接受。在临床实践中常规使用的许多药物折点源于25年前的临床操作，而这些操作以今天的监管和质量保证标准来见是不可接受的。不论在美国和欧洲，不断评估和更新折点已得到了微生物学家、临床医生和监管机构的普遍认同。例如，2007年通过的美国食品和药物管理法修正案(FDAAA)规定FDA更新折点，且且美国FDA已经在2009年作出回应，为行业印发指导文件，以在系统性抗菌药物产品和药敏试验设备中更新药敏试验信息标记。M100-S20修订后的折点能更好地反映抗菌药物在以目前推荐方案治疗由菌株引起的感染时的真实疗效。对产ESBL菌株的研究结果发挥了重大作用。最初CLSI推荐进行ESBLs筛选及确证测试，且规定对于产ESBL的菌株，将青霉素，头孢菌素和氨曲南的药敏结果由敏感改为耐药，这条规定基于以下几点：1)研究观察到某些产ESBL菌株，之上药物的MIC有升高但仍然在敏感区间(使用旧的折点)；2)有限的临床观察发现，对于产ESBL菌株引起的感染，病人预后较差。ESBL试验建议是处理壹个新型耐药机制的短期解决方案。随后，更多的耐药机制被发现(例如，新型的ESBLs和AmpC酶)，且且越来越多的菌株被发现产多种酶导致ESBL的检测更加复杂。之上事实以及人们对头孢菌素类和单环β内酰胺类的PK-PD因素对治疗效果决定作用的认识导致折点的变更。折点修订后，ESBLs筛选和确证试验将不再是决定治疗策略所必需。当菌株产多种酶时(如当菌株同时产ESBLs和AmpC酶时将导致假阴性的结果)ESBL表型检测和确证试验的准确性将降低，而在当前，产多种酶的菌株已非常普遍。菌株的MIC和临床预后的相关性强于菌株携带的耐药机制。CLSI认为，新的折点将为病人治疗提供更合理的信息且降低临床实验室工作的不确定度和工作量。 Ⅱ新折点和旧折点的比较
对于肠杆菌科菌，头孢菌素和氨曲南的折点修订如下(作为比较，也列出旧的折点)： 表2.M100-S20MIC折点更新(μg/ml): 抗菌药物 头孢唑啉 头孢噻肟 头孢唑肟 头孢曲松 头孢他啶 氨曲南 敏感 ≤8 ≤8 ≤8 ≤8 ≤8 ≤8 旧(M100-S19) 中介 16 16-32 16-32 16-32 16 16 耐药 ≥32 ≥64 ≥64 ≥64 ≥32 ≥32 新(M100-S20) 敏感 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤4 ≤4 中介 2 2 2 2 8 8 耐药 ≥4 ≥4 ≥4 ≥4 ≥16 ≥16 表3.M100-S20纸片扩散法折点更新(mm):
抗菌药物 头孢唑啉 敏感 ≥18 旧(M100-S19) 中介 15-17 耐药 ≤14 敏感 NA 新(M100-S20) 中介 NA 耐药 NA
2024年(生物科技行业)CLSI临床微生物实验室标准解读
