猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
作者：陈希文;汪谦;尹苗;李莲;罗文涛;杨凤;郭爱伟;周杰珑;王雄清
作者机构：绵阳师范学院动物应用技术研究所,绵阳 621000;四川铁骑力士集团冯光德实验室,绵阳 621006;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;绵阳师范学院动物应用技术研究所,绵阳 621000;四川铁骑力士集团冯光德实验室,绵阳 621006;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;绵阳师范学院动物应用技术研究所,绵阳 621000;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;绵阳师范学院动物应用技术研究所,绵阳 621000 来源：中国畜牧兽医 ISSN：1671-7236 年：2017 卷：044 期：006
页码：1630-1636 页数：7
中图分类：S852.65 正文语种：chi
关键词：逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP);猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);快速检测
摘要：为建立一种快速、灵敏、简便的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)早期检测方法,本研究利用逆转录环介导恒温扩增技术(RT-LAMP),针对PRRSV的ORF5基因片段设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在65 ℃恒温条件下进行逆转录扩增,通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和加入SYBR Green Ⅰ染料肉眼判断结果,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法.结果表明,该检测方法具有良好的特异性,
与其他常见病毒如猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒等无交叉反应,较普通RT-PCR灵敏性高100倍.采用RT-LAMP和RT-PCR分别对10份临床样本同时进行检测,符合率为100%.因此,本研究建立的RT-LAMP是一种可适用于临床PRRSV检测的快速、简单、灵敏、特异的检测方法.
猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
