鮰爱德华菌T6SS eivpP基因缺失突变株的构建

鮰爱德华菌T6SS eivpP基因缺失突变株的构建

郭羿[1];杨晓宇[1];倪萍[1];王一婷[1];郭思聪[1];马红丽[1];赵小然[1];叶仕根[1];

【期刊名称】《大连海洋大学学报》 【年(卷),期】2019(034)001

【摘要】为研究鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluriⅥ型分泌系统(T6SS)EivpP与其他分泌蛋白之间的相互作用及其在细菌致病过程中的作用机制,在克隆到eivpP基因上、下游同源臂的基础上,采用融合PCR技术制备了eivpP基因缺失用的融合片段,并成功克隆到自杀质粒pDM4内,再将重组自杀质粒转化到大肠杆菌S17-1λ(pir)中,与鮰爱德华菌野生菌株ATCC33202共培养。经同源重组和蔗糖负筛获得鮰爱德华菌eivpP基因缺失突变阳性克隆,经PCR鉴定结果显示,突变株未检测出eivpP基因,即eivpP基因彻底敲除成功。本试验结果可为研究eivpP基因在鮰爱德华菌致病过程中的作用机制提供数据资料,为鮰爱德华菌弱毒疫苗的研发提供理论依据。 【总页数】6页(P.27-32)

【关键词】鮰爱德华菌;eivpP基因;基因敲除;缺失突变

【作者】郭羿[1];杨晓宇[1];倪萍[1];王一婷[1];郭思聪[1];马红丽[1];赵小然[1];叶仕根[1];

【作者单位】[1]大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室,大连市海珍品疾病防控重点实验室,辽宁大连116023;[1]大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室,大连市海珍品疾病防控重点实验室,辽宁大连116023;[1]大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室,大连市海珍品疾病防控重点实验室,辽宁大连116023;[1]大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实