葡萄糖酸钠的分光光度法测定*
翁艳军1，林凯2，辛嘉英2*
【摘 要】利用葡萄糖酸钠在强酸性条件下形成内酯，通过羟胺-三氯化铁显色法生成红棕色异羟肟酸-Fe3+络合物，进行分光光度检测。建立标准曲线，其线性方程为y=113.0833χ+0.1162，R2=0.9999，检测波长为500nm，在1×10-3～9×10-3mol·L-1范围内具有良好的线性关系，平均加标回收率为99.79%，并且该方法能够检测Au/γ-Al2O3催化葡萄糖氧化反应液中葡萄糖酸钠的含量。
【期刊名称】化学工程师 【年(卷),期】2014(000)007 【总页数】4
【关键词】葡萄糖酸钠；分光光度法；羟胺-三氯化铁法 分析测试
葡萄糖酸及其盐是葡萄糖氧化的主要产物，因其具有良好的生物相容性和生物可降解性，已广泛应用于医药、食品、造纸和混凝土等工业[1]。葡萄糖酸是机体代谢中间产物，对肠道有益菌群双歧杆菌具有增值作用；葡萄糖酸钠对维持细胞渗透压，调节人体内酸碱平衡、恢复神经正常功能具有重要作用；其钙盐在医药上用于消除过敏、补充钙质；葡萄糖酸锌能够改善生长发育迟缓、营养不良等症状。目前，生物发酵法是工业化生产葡萄糖酸的主要方式。但随着负载型金催化剂在催化葡萄糖氧化方面研究的不断深入，探索葡萄糖酸高效合成的新方法已引起人们的重视[2]。本课题组已在利用甲烷氧化菌素（methanobactin，Mb）还原法制备纳米金方面进行了初步探索[3,4]。由于
葡萄糖酸不具有灵敏的紫外吸收，通常需要对其进行衍生化等操作，并且检测仪器昂贵。羟胺-三氯化铁法作为检测具有酰胺键和内酯类化合物已得到广泛应用[5-9]。该方法具有操作方法简便、检测结果重复性和灵敏度良好等优点。其反应机理见图1。
本文建立了利用羟胺-三氯化铁法检测葡萄糖酸钠的方法，考察了测定过程中的影响因素，并应用于Au/γ-Al2O3催化葡萄糖氧化反应液中葡萄糖酸钠含量的测定。
1 实验部分
1.1 仪器及主要试剂
UV-2550紫外-可见分光光度计（岛津）；电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；箱式电阻炉（上海跃进医疗器械有限公司）；油浴锅（天津市欧诺仪器仪表有限公司）。
葡萄糖（A.R.天津市天力化学试剂有限公司）；葡萄糖酸钠（G.R.天津市科密欧化学试剂有限公司）；盐酸羟胺（A.R.天津市福晨化学试剂厂）；NaOH（A. R.天津市光复科技发展有限公司）；FeCl·36H2O（A. R.天津市天力化学试剂有限公司）。 1.2 实验方法 1.2.1 试剂配制
标准溶液用葡萄糖酸钠配制1×10-3、3×10-3、5×10-3、7×10-3、9×10-3mol·L-1的标准溶液，并用4 mol·L-1HCl调pH值至1.5。
羟胺碱试剂4mol·L-1盐酸羟胺和4mol·L-1NaOH等体积混合，并用适量以上溶液调节pH值至8，该试剂应现用现配。
FeCl3试剂称取10g FeCl·36H2O，用0.1mol·L-1HCl溶液定容至100mL，即为0.37mo·lL-1FeCl3试剂。1.2.2操作步骤向10mL带有磨口塞的试管中加入1mL 1×10-3～9×10-3mol·L-1葡萄糖酸钠标准溶液，调节溶液pH值为1.5，置于沸水浴中加热30min，冷却至室温，依次加入2mL羟胺碱试剂，1m L 4mol·L-1HCl和1m LFeCl3试剂显色，迅速振摇去除气泡。空白组用1mL去离子水代替试样，其余试剂及用量不变。用1cm石英比色皿以空白组为对照，进行可见光谱扫描，并在500nm处测定吸光度（OD500）。测定工作需在10min内完成。
2 结果与讨论
2.1 可见光谱扫描和标准曲线的绘制
按1.2方法对葡萄糖酸钠标准溶液进行可见光谱扫描。结果见图2。产生的红棕色异羟肟酸-Fe3+络合物在500nm附近有最大吸收峰。因此，本实验选取500nm为测定波长，并绘制葡萄糖酸钠标准曲线。
由图3可知，葡萄糖酸钠标准溶液浓度在1× 10-3～9×10-3mol·L-1范围内与OD500呈现良好的线性关系。线性方程为：y=113.0833χ+0.1162，R2=0.9999。
2.2 显色时间对测定结果的影响
葡萄糖酸钠标准溶液按实验方法显色后，放置不同时间，测定其对吸光度影响。 由图4可知，充分振摇去除气泡后，随时间的增加，棕红色铁络合物吸光度逐渐减小，表明异羟肟酸-Fe3+络合物稳定性较差。因此，测定时间应控制在样品显色后10min内完成。若大批进行样品分析时，应分批加入FeCl3试剂进行显色，减小误差[9]。
葡萄糖酸钠的分光光度法测定
