(4)培养基配制好后，灭菌前应进行的工作是______________。 (5)从配制培养基到培养完成，所采用的防止杂菌污染的具体操作事项有_________________________________________________
______________________________________(答出两点即可)。 (6)如果是用试管培养微生物，在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是__________________________________________。
将其放入________℃冰箱里保藏，但这种方法的保存时间不长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，需要放在________℃的冷冻箱中保存。
答案：(1)提供碳源和氮源 (2)琼脂(凝固剂) (3)所培养微生物对各营养成分的需要量 (4)调整pH
(5)高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种 (6)扩大接种面积 4 —20
8．科学家发现，在微生物M(单细胞)产生的脂肪酶作用下，从地沟油中提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油。
(1)用培养基培养微生物时，培养基中应有________、________、________和________________等营养，同时还必须满足微生物生长对________、________、________的要求。在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用________培养基，可以在培养基中添加________作为唯一碳源。
(2)培养基灭菌采用的最适方法是_________________________ ___________________________________________________法。 (3)图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果
图，过程一的接种方法是____________，过程二的接种方法是____________________，此方法计数的微生物M的数目________(填“>”“＝”“<”)实际活菌数，接种后应注意培养皿要________放置。
解析：(1)用培养基培养微生物时，培养基中应有碳源、氮源、水、无机盐等营养，同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、环境条件等的要求。在筛选微生物M时，应用选择培养基，在培养基中添加植物油作为唯一碳源。(2)培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。(3)过程一的接种方法是平板划线法，过程二的接种方法是稀释涂布平板法，此方法计数的微生物M的数目要小于实际活菌数，接种后应注意培养皿要倒置放置，防止水珠落下，污染培养基。
答案：(1)碳源 氮源 水 无机盐 特殊营养物质 pH 氧气 选择 植物油 (2)高压蒸汽灭菌 (3)平板划线法 稀释涂布平板法 < 倒置
9．为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
(1)培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤：计算→称量→__________→__________→倒平板。
(2)称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用______挑取，放在______上称量。由于牛肉膏和蛋白胨________，称量时动作要迅速，称量后要及时盖上瓶盖。
(3)在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有________________________________________________
等大肠杆菌生长所需的营养要素。
(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法如________和________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。
解析：配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的基本步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。称量时，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量，称量时动作
要迅速。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素，所以常用来培养大肠杆菌。微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。
答案：(1)溶化 灭菌 (2)玻璃棒 称量纸 容易吸潮
(3)碳源、氮源、无机盐、水 (4)平板划线法 稀释涂布平板法 菌落 10．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平，呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。
(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 (2)细菌鉴定：实验流程如下图所示。
①对配制的液体培养基等需采用________________法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。
②挑选可疑菌落制片后，用________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 ③接种可疑菌后，在温度为35 ℃的环境中培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是__________________________________。
对照组试管中应加入______________________________
________，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”)，则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染；反之，则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有
_______________________________________________________。
解析：(2)①培养微生物的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；由于炭疽杆菌是异养型微生物，培养基中应加有机碳作碳源。②炭疽杆菌呈竹节状排列，需借助显微镜观察。③接种培养后，液体培养基由澄清变浑浊是细菌大量繁殖所致。实验应遵循单一变量原则和等量原则，实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液，对照组应加入等量的生理盐水；若疑似患者被炭疽杆菌感染，则培养6 h后，实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡，浑浊度会明显低于对照组。④接种疫苗后，机体通过体液免疫产生抗体，与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞、B细胞和浆细胞。
答案：(2)①高压蒸汽灭菌 有机碳 ②显微镜 ③细菌大量繁殖 等量的生理盐水 低 ④吞噬细胞、浆细胞
11．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配置培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题：
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中，实验组的操作是__________________________。 (3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
答案：(1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间 (3)污染
2019秋金版学案高中生物·选修1（人教版）练习：专题2课题1微生物的实验室培养 含解析
