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高效液相色谱法分析芳香类化合物
系别：化学物理系 学号：PB09206108 姓名：倪 宇 飞
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高效液相色谱法分析芳香类化合物
一、实验目的
（1）了解高效液相色谱仪的基本结构及基本作用；
（2）了解色谱分离的基本原理，尤其是反相色谱的基本规律； （3）掌握色谱的基本定性、归一化定量方法。
二、实验原理
以液相为流动相的色谱称为液相色谱。广义的讲，可以分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱。如果按照两相分离过程的物理化学原理进行分类，可分为吸附色谱、分配色谱、凝胶色谱、离子色谱、亲和色谱等。
高效液相色谱适合于分析沸点高不易挥发、受热不稳定易分解的、分子量大的、不同极性的有机化合物，生物活性物质和多种天然产物，合成的和天然的高分子化合物等。它们涉及石油化工产品、食品、合成药物、生物化工产品及环境污染物等，约占全部有机化合物的80%.。 1.吸附色谱
吸附色谱法又称为液固色谱法，是液相色谱法中发展历史最长的一种方法。液固色谱法的固定相为固体吸附剂，常用的是碳酸钙、硅胶、三氧化二铝、氧化镁、活性炭等。固定相的表面存在着分散的吸附中心，溶质分子和流动相分子在吸附剂表面呈现的吸附中心上进行竞争吸附，溶质分析反复的被吸附，又反复的被流动相分子顶替解吸，随着流动相的流动而在柱子中向前移动。由于不同的待测分子在固定相表面的吸附能力不同，使得吸附-解吸附的速度也不同，导致各组分洗出的时间不同，实现各组分物质被分离，所以溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的吸附-解吸附平衡就是液固吸附色谱具有选择性分离的基础。 2.分配色谱
分配色谱是基于样品分子在包裹与惰性载体（基质）上的固定相液体和流动相液体直接按分配平衡的色谱方法，又称为液液色谱法。在固液色谱中使用的固体吸附剂，如全多孔球形、无定形微粒硅胶、全多孔氧化铝等皆可作为液液色谱固定相的惰性载体。但作为固定相的液体往往容易溶解到流动相找哦那个去，导致保
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留值减少，柱效下降，使得重复性很差，不大方便人们所采用。直到化学键合固定相的出现，才使液液色谱得到广泛应用。化学键合固定相是将固定相通过化学结合的方法结合到惰性载体上，这样固定相就不会溶解到流动相中。常见的化学键固定相有十八烷基三氯硅烷等，它是将十八烷基三氯硅烷通过化学反应与硅胶表面的硅羟基结合，在硅胶表面形成化学键合态的十八碳烷基，其极性很小，而常用的流动相，如甲醇、乙腈以及它们和水的混合溶液，极性比固定相大，因此成为反相高效液相色谱；反之流动相的极性比固定相小，称之为正相高效液相色谱。 3.凝胶色谱
凝胶色谱与其他几种液相色谱不同，不是通过样品分子与固定相之间的相互作用力（吸附、分配和离子交换等）的差异被分离，而是根据样品分子的尺寸不同而达到分离目的，因而凝胶色谱又常被称作体积排阻或空间排阻色谱。
凝胶色谱以多孔性填料做固定相。样品分子的分离受填料孔径的影响，比填料孔径大的样品分子不能进入填料的孔内，最先流出色谱柱。填料颗粒上有很多不同尺寸的孔，在那些可以进入孔内的样品分子中，体积较大的分子可以利用的孔较少，所以样品分子按体积从大到小的顺序依次流出色谱柱。在凝胶色谱中，流动相的作用不再是控制分离，而是溶解样品。以有机溶剂作流动相的称凝胶渗透色谱（GPC），以水溶液作为流动相的成为凝胶过滤色谱。 4亲和色谱、离子色谱
亲和色谱与其他色谱伐相比较，其突出优点是可以对天然生物活性物质进行高特效的分离和纯化，具有高的浓缩效应，可以从大量的样品基本中分离纯化出所希望获取的少量生物活性物质。这种特效的原因是在亲和色谱固定相基体上，键和了具有锚式结构特征的配位体。
离子色谱（GPIC），又称为离子交换色谱，分离机理为离子交换。它是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的颗粒交换，依据这些离子对交换剂有不同的亲和力而被分离。它是离子色谱的主要分离方式，用于亲水阴、阳离子的分离。 5.仪器结构与原理
高效液相色谱仪最基本的组件是输液泵、进样器、色谱柱、检测器和工作站。输
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