特异性干扰TACC3基因表达对CD133+CD44+口腔鳞癌
干细胞增殖及凋亡的影响
段瑞;李永生;夏翼超
【期刊名称】《中国组织工程研究》 【年(卷),期】2017(021)025
【摘要】背景:研究表明,TACC3基因在多种肿瘤中均表达上调,因此体外特异性干预TACC3的表达,可能是治疗或干预肿瘤生长的重要靶点.目的:探讨沉默TACC3基因表达对口腔鳞癌干细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用免疫磁珠分选技术从人口腔鳞癌细胞Cal-27中分选出CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞.shRNA
转染组设计及合成
TACC3 shRNA
序列,利用
LipofectamineTM2000将TACC3 shRNA序列转染至CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞,设置空载体转染阴性对照组和未转染组.转染48 h后,采用MTT、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验检测沉默TACC3基因对体外CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响;Western blot检测沉默TACC3基因对CD133+CD44+口腔鳞癌干细胞Ki67、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.结果与结论:①细胞增殖:shRNA转染组细胞增殖速度、增殖相关蛋白Ki67表达水平明显低于阴性对照组和未转染组(P<0.05);②细胞克隆形成能力:shRNA转染组细胞克隆形成能力显著低于阴性对照组和未转染组(P<0.05);③细胞凋亡:shRNA转染组细胞凋亡高于阴性对照组和未转染组,促凋亡蛋白Bax水平高于未转染组、对照组,抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于阴性对照组和未转染组;④结果表明:干扰抑制TACC3基因表达,可抑制口腔鳞癌干细胞的增殖,促进其凋亡.oCKGROUND: Studies have indicated that the